第14讲 气相色谱法.ppt

第14章 气相色谱法 Gas Chromatography（GC） 色 谱 法 一种高效的、应用范围广的分离分析技术，可用于从小分子到大分子各种不同性质物质的分离，包括少量样品的分析及大量样品成分分离制备等。 由于仪器进步及各个学科分离分析复杂物质需要，近几十年来发展很快，是最有效的分离手段，涉及各个学科领域，是现代化学发展的基础之一。约有60%以上的分析工作是基于色谱法完成的。 14-1 色谱法基本理论 14-1-1 概述 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语 14-1-3 色谱基本原理 14-1-4 分离度 14-1-5 基本色谱分离方程 14-1-1 概述（1） 色谱法起源 将绿色植物的石油醚萃取液加载到装有吸附剂CaCO3的柱子上端，然后用石油醚淋洗。 固定相：CaCO3 流动相：石油醚 本质：CaCO3对萃取液中各成分的吸附能力不同，从而将其分离成不同色带。 14-1-1 概述（2） 色谱法发展的历史 14-1-1 概述（3） 色谱法基本原理（以柱色谱为例） 在外力作用下，流动相以一定流速连续流经与其互不相溶的固定相表面（色谱柱）。待分离试样被一次性注入色谱柱头，各组分在同一时刻进入色谱柱。 各组分与两相的不同作用（溶解、吸附、渗透或离子交换等）导致其在两相间的“分配系数”不同。 在随流动相移动通过一定长度的色谱柱时，各组分在两相之间进行了反复多次（103?106）的分配过程，使得分配系数不同的各组分在色谱柱中移动速率产生差异，从而彼此分开形成“单组份”的带或区，依次流出色谱柱。 根据色谱柱末端检测器的响应信号可实现对各组分的定性/定量分析 14-1-1 概述（4） 色谱仪的基本结构框图 14-1-1 概述（5） 色谱法分类（1）——按色谱动力学过程 淋洗色谱法：又称为洗提法。将待分离组分注入色谱柱柱头后，用与固定相作用比各组分都弱的流动相洗脱。流动相连续流过色谱柱并携带样品组分在柱内向前移动，不同组分依据与两相作用力的差别，依次被洗脱，形成连续呈Gaussian曲线的色谱峰。 置换色谱法 迎头色谱法 14-1-1 概述（6） 色谱法分类（2） 14-1-1 概述（7） 色谱法的特点 分离效能高：能在较短时间内对组成极为复杂，各组分性质极为相近的混合物同时进行分离测定； 灵敏度高：高灵敏的色谱检测器可检测10-11?10-13 g的物质，适于痕量分析；样品用量极少，一般以?g计，有时仅以ng计； 分析速度快：一般几或几十分钟便可完成对一个复杂试样的分析； 应用范围广：选择适当的色谱模式几乎能分析所有的化学物质。 虽然传统色谱检测器的定性能力较差，但与定性能力强的光谱方法如MS、FTIR、NMR等联用，可大大提高其定性分析能力。 Less than 30 minutes separation for 18 of amino acids 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（1） 色谱流出曲线（色谱图）： 以进样为起点，检测器响应信号随时间/流动相体积变化的曲线 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（2） 基线：仅有流动相通过时检测器时响应。稳定的基线不应随时间发生单向变化，而是在很小的范围内呈现高频的波动。 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离。（定量） 峰面积：色谱曲线与基线间的面积。（定量） 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（3） 保留值（1） 死时间t0：流动相通过色谱柱所用的时间。通常采用不与固定相发生作用（非滞留组分）但能被检测器响应的物质来测定。 保留时间tr：组分从进样到出现色谱峰值所需要的时间。 调整保留时间tr?： 指组分在固定相中停留的时间。 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（4） 保留值（2） 死体积V0： 指死时间内流经色谱柱的流动相体积。包括色谱柱中不被占据的空间及进样系统管道和检测器系统的总体积。 保留体积Vr： 指保留时间内流经色谱柱的流动相体积。 调整保留体积Vr?： Fco为色谱柱出口流动相的体积流速（mL?min-1） 用保留体积定性可以消除流动相流速波动的影响。 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（5） 保留值（3） 相对保留值： 气相色谱法中该值仅与柱温和固定相性质有关（液相色谱法中还与流动相性质有关），而与色谱柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关，作为定性指标较tr、Vr可靠。 用?（??1）表示时称为选择性因子，是衡量固定相选择性的重要指标。 14-1-2 色谱流出曲线及相关术语（6） 区域宽度：用于衡量柱效及反映色谱操作条件下的动力学因素的重要参数。 从色谱流出曲线上可以得到什么信息？ 根