_玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及间接竞争ELISA检测方法的建立.pdfVIP

微生物学通报 DEC 20, 2011, 38(12): 1793880 Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及间接竞争 ELISA 检测方法的建立 1 1 1 2* 1 1 2 2 2 1* 王元凯 王君 王雨晨 陈志飞 严亚贤 郝倩雯 李树清 于翠 杨翠云 孙建和 (1. 上海交通大学 农业与生物学院 上海市兽医生物技术重点实验室 上海 200240) (2. 上海出入境检验检疫局 上海 200135) 摘 要: 玉米赤霉烯酮具有较强的生物毒性, 检测谷物中的玉米赤霉烯酮在食品和饲料安全中具 有重要的作用。将玉米赤霉烯酮与牛血清白蛋白的偶联物免疫 BALB/c 小鼠制备单克隆抗体, 并 建立基于单克隆抗体的酶联免疫法作为检测玉米赤霉烯酮的方法。结果共筛选到4 株抗玉米赤霉 烯酮单克隆抗体, 3 株抗体亚类为IgG1, 1 株为IgG2b 。选择其中的一株杂交瘤细胞2C9 制备小鼠 腹水, 纯化后测定了抗体效价为 1/40 000。以此单抗建立的间接竞争ELISA 方法, 其半数抑制率 (IC50)为 1.90 ng/mL, 检测限(IC10)为0.051 ng/mL, 检测区间(IC20−IC80)为0.115−13.900 ng/mL; 且对玉米赤霉烯酮有很好的特异性。回收率检测在样品含 1.46−93.80 μg/kg 时回收率为 96.5%−113.0%。本实验建立的检测方法可用于多种谷物及饲料样本中玉米赤霉烯酮的检测。 关键词: 玉米赤霉烯酮, 单克隆抗体, 酶联免疫法, 回收率 Preparation of anti-zearalenone monoclonal antibodies and development of an indirect competitive ELISA for zearalenone WANG Yuan-Kai1 WANG Jun1 WANG Yu-Chen1 CHEN Zhi-Fei2* YAN Ya-Xian1 Hao Qian-Wen1 LI Shu-Qing2 YU Cui2 YANG Cui-Yun2 SUN Jian-He1* (1. Key Laboratory of Veterinary Biotechnology , School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China) (2. Shanghai Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shanghai 200135, China) Abstract: Zearalenone (ZEN) is a high toxic mycotoxin.