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[目的和要求] 1.掌握:粪便直接涂片法的原理,透明胶纸 法的原理。 2.熟悉:粪便直接涂片法、透明胶纸法的操作要点。 3.了解:粪便直接涂片法、透明胶纸法的注意事项。 材料 载玻片、盖玻片、竹签、生理盐水、宽2cm透明胶纸带、显微镜。 1.直接涂片法 为最常见的粪检方法。本法适用于检查蠕虫卵(蛲虫卵除外)、原虫滋养体。 原理: 为了不改变涂片的渗透压而损坏活的病原体,所以用生理盐水作为粪便的稀释剂,使和粪便粘在一起的病原体,通过生理盐水的涂抹稀释作用,成为单个物体分散在涂片中,这样既不妨碍透光作用,又能暴露病原体的形态结构,便于我们在镜检中识别它们。方法简便,出结果快。 操作 1.涂片 在洁净的载玻片中央,滴生理盐水一滴,用竹签取火柴头大小的粪便,在生理盐水中混匀,摊开呈薄膜状;其厚度以载玻片置于报纸上,能透过粪膜隐约辨认玻片下的字迹为宜。 2.显微镜观察 一般在低倍镜下检查,如发现可疑物再转高倍镜观察。镜检时光线要适当,过强的亮度会影响观察结果。应注意虫卵与粪便中的异物区别,可依据虫卵的形状、大小、颜色、卵壳(包括卵盖等)和内含物等特征加以鉴别。由于雌性蛔虫产卵量大,该法特别适用于检查蛔虫卵,涂片一张的检出率约为85%,涂片3张的检出率可达90%~95%。 注意事项: ①玻片应清洁无油,手持玻片时勿将手指接触玻片表面,以避免油渍污染; ②粪膜厚薄适当,以透过粪膜能见到书本上的字迹为宜。过厚,光线不宜透过;过薄,则检出率降低。 ③观察结果应按一定顺序,以免遗漏,夏天要注意观察的速度以防粪膜干燥,影响结果的观察; ④正确使用显微镜,低倍镜转高倍镜时须注意勿使粪膜污染镜头(看高倍镜时最好加盖玻片); 注意事项: ⑤镜检中发现有意义的成分(如红、白细胞和夏科-雷登结晶等)应记录; ⑥粪中成分复杂,应加以与寄生虫卵或包囊以及宿主的组织、细胞成分相鉴别; ⑦检查原虫滋养体时,涂片应稍薄; ⑧用过的竹签、玻片、粪纸包等务必投入指定的容器内,养成防污染的习惯。 2.透明胶纸法 适用于蛲虫卵、带绦虫卵的检查。 基本原理: 蛲虫雌成虫在患者肛周及会阴部皮肤上产卵,带绦虫孕节从肛门排出或主动爬出时,节片被挤破使虫卵粘附于患者肛周皮肤上,故利用胶纸粘取虫卵进行检查。 操作方法: ①将宽2cm的透明胶纸剪成长约6cm的小段。 ②将一端向胶面折叠约0.5cm,再贴在干净的载玻片上。 ③玻片一端写受检者姓名、编号等。 ④检查时,将胶纸揭下,用胶面粘贴肛门周围皮肤,然后将胶面平铺于载玻片上,低倍镜下检查。 注意事项: ①清晨起床后,在未排便之前检查; ②胶纸与玻片之间有许多气泡时,镜检前可揭起胶纸,滴少量生理盐水后将胶纸平铺再镜检。 * * 实验二、肠道线虫的检验 ? 21℃ 60% 微生物实验室 *
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