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厌氧氨化途径对无机氮脱氮贡献的同位素示踪  齐孟文  中国农业大学  1.研究意义 长期以来，反硝化过程被认为是自然环境中无机氮去除氮的唯一生物途径。 然而，20世纪90年代发现，存在着另一厌氧氨化途径。它是由自养的厌氧氨化 菌,在缺氧条件下，以铵态氮为电子供体、硝态氮为电子受体，直接将二者转化 为氮气的途径。定量厌氧氨化途径对无机氮脱氮过程的相对贡献，对于全面了解 氮的循环过程具有理论和实际意义。 2.研究方法 上述两种途径，由于反应机理不同，可由同位素示踪技术（isotpe pairing technique) 对各自贡献进行计量分析。反硝化产生的 N 2 ，两个N 均来自 N NH - N 15 NO - N 3 ,厌氧氨化产生的 2 ，一个来自 4 ，另一个来自NO - N 3 ，当用 N 示踪时，利用所谓的半标记技术，进行NH + 与15 NO - 处理，两个过程之间的差异 4 3 可由N 2 分子的同位素构成不同加以区分。 反硝化 厌氧氨氧 3.实验过程 2.5ml 12.6ml 将样品，如 左右的活性污泥样品，放入 柱状玻璃瓶中，同时加 入一颗玻璃珠以利于反应时进行摇匀，然后注满被氮气饱和的无氧水，使其形成 30h - （NH ）SO 15 无氧环境，室温下培养 ,以去除其中的NO ,然后分别注入 和 N 3 4 2 4 98.2% 15 丰度为 的 ，在旋转震荡器上恒温培养一定时间，注入 Na NO 3 200 l μ -1 ZnCl CL - MS 7mol L ⋅ 2 以终止反应，顶空气体通过 分析。 4.计量分析