聚乙二醇修饰的瓜尔胶微囊及其药物负载性能-中山大学化学学院.DOC

可降解瓜尔胶载药微囊的聚乙二醇修饰* 欧富初 张黎明 中山大学化学与化学工程学院,广州 510275 摘要 通过将多聚磷酸纳滴加到阳离子瓜尔胶和聚乙二醇(PEG)水溶液中,利用聚电解质的离子凝胶化反应制得经PEG修饰的可降解瓜尔胶微囊,扫描电镜照片显示PEG包覆在瓜尔胶微囊表面。通过对不同浓度牛血清蛋白和阿司匹林二种药物的负载实验,发现修饰后的微胶囊相比于未经修饰的微胶囊有增大的负载率和载药量。 关键词 微胶囊；药物载体；瓜尔胶；聚乙二醇；牛血清蛋白；阿司匹林 中图分类号 药物在体内的吸收、分布、代谢及排泄是一个连续变化的动态过程。普通制剂中药物被体内吸收后,血药浓度容易发生波动起伏,出现所谓“峰谷”现象,当血药浓度达高峰时,有可能引发某些毒副作用,而处于低谷时,亦可能低于有效浓度。因此,研究和开发新型药物输送和控释载体,对于临床医疗水平的提高具有重要意义[1]。 聚合物微胶囊可在体内特异性分布,利用对特定器官、组织的靶向性和药物的缓释性来降低药物的毒副作用、提高药物的生物利用度,而借助共价交联、溶剂挥发、相分离和乳化法等合成技术则可制备出各种微胶囊。目前,该类药物载体的研究和发展主要集中在以下方面：①优选聚合物原材料,使之具有优良的生物相容性,最好是释放药物后能在体内完全生物降解,且聚合物及降解产物对人体均无毒副作用；②探索新的制备技术,在提高药物包埋率的同时最大限度地保留药物特别是多肽、蛋白类药物的完整性和活性；③对载药微囊进行表面修饰,以期增强药物的包封和运载性能、提高与生物表面相互作用的敏锐性。 为此,选用可生物降解且具良好生物相容性的阳离子瓜尔胶为主要原料,利用聚电解质的离子凝胶化反应,在避免高温、有机溶剂及其它苛刻条件下首次制得经聚乙二醇表面修饰或未经修饰的可降解瓜尔胶载药微囊。本文主要报道聚乙二醇修饰对瓜尔胶微囊载药性能的影响。 1 实验部分 1.1 原料与试剂 阳离子瓜尔胶:ECOPOL-14S,广州市祺晟化工有限公司提供；多聚磷酸钠: 分析纯,天津市科密欧化学试剂开发中心；聚乙二醇(PEG)：分子量为10000,上海化学试剂公司（进口分装）；考马斯亮蓝G250：上海伯奥生物科技有限公司（进口分装）；牛血清蛋白（BSA）：进口分装；乙酰水杨酸（阿司匹林）： Alfa Aesar?产品；乙醇95%、无水乙醇、氢氧化钠,磷酸：分析纯,广州化学试剂厂；磷酸：85％,AR,郑州市德众化学试剂厂。 1.2 微囊制备 称取阳离子瓜尔胶,将其配制成0.5%浓度的溶液；再将多聚磷酸钠配制成10 mg/ml溶液。制备时,取20 ml的阳离子瓜尔胶溶液加纯水稀释至194 ml,于室温、磁力搅拌器作用下充分搅拌,然后缓慢滴加所需体积的多聚磷酸钠水溶液,即得瓜尔胶微囊胶体悬浮液；再将所得悬浮液经TGL-16C高速离心机(上海安亭科学仪器厂产)高速离心,分离出沉淀物并经德国ALPHA1－4型冷冻干燥机冷冻干燥,即得所需瓜尔胶微囊。在滴加多聚磷酸钠溶液之前,保持瓜尔胶微囊制备条件,往阳离子瓜尔胶溶液中加入8 ml浓度为10 mg/ml的PEG溶液,重复上述过程即得经PEG修饰的瓜尔胶微囊。 1.3 微囊形貌观察 用胶头滴管取少量未经修饰的和经PEG修饰的瓜尔胶微囊胶体悬浮液至载玻片上,干燥后真空镀白金,然后在日本Hitachi公司S-520扫描电子显微镜下观察微囊形貌。 1.4 药物负载及性能分析 相应于未经修饰的和经PEG修饰的瓜尔胶微囊制备条件,往初始溶液体系中分别加入所需浓度的牛血清蛋白和乙酰水杨酸,制得相应的载药瓜尔胶微囊样品液。然后将样品液在室温下高速离心5 min,取其上清液分别测定游离药物浓度,再按下面式子计算微囊对药物的负载率和载药量： 负载率＝（药物初始质量－游离药物的质量）×100％ / 药物总质量 载药率＝（药物初始质量－游离药物的质量）×100％/ 微囊质量 1.5 测定牛血清蛋白含量标准曲线的绘制[2] 先配制考马斯亮蓝显色液：准确称量考马斯亮蓝G250 100 mg,溶于50ml 95％的乙醇溶液中,与100ml 85％磷酸（W/V）混合,加水至1000 ml。再取11个25 ml的小锥形瓶依次编号,在1～11号锥形瓶中依次加入0.5 mg/ml的牛血清蛋白水溶液0μl、10μl、20μl……100μl,并依次加入蒸馏水100μl、90μl、80μl……0μl,分别加入5 ml上述显色液,充分振荡均匀,以1号锥瓶内的混合液为参比,采用721型可见分光光度计(上海精密科学仪器厂产)在2分钟～15分钟内分别测定2～11号锥瓶内混合液在595 nm处的光透过率(T),以蛋白质浓度(C)为横坐标,T为纵坐标作图(见图1)；有关数据经线性回归