胃癌干细胞.doc

润文宝 | 日期：2011-06-25 胃癌干细胞的研究进展 恶性肿瘤的克隆性增殖生长、维持及转移潜能取决于一群数量稀少、具有自我更新(self-renewal)潜力的细胞群体——肿瘤干细胞(Cancer stern cell，CSC)。目前肿瘤的放射和化学治疗对细胞周期活跃的肿瘤细胞具有较强的杀伤作用，但不能根除细胞周期相对沉默的肿瘤干细胞，这可能是肿瘤复发的主要原因。胃癌对人类健康危害极大。研究胃干细胞及胃癌干细胞发生、发展的分子和细胞学机制，发现相关的特异分子靶点和针对这些靶点的药物，将为胃癌相关基础研究及临床靶向治疗提供新的切人点。 一、肿瘤干细胞学说的提出 肿瘤组织与胚胎组织间具有相似性，肿瘤可能起源于胚胎样组织。肿瘤细胞与胚胎干细胞及成体干细胞间存在许多相似性。近年来提出的肿瘤干细胞学说认为，肿瘤组织中存在极少量细胞，具有无限自我更新和高度增殖能力以及多种分化潜能，能产生不同表型的肿瘤细胞，使肿瘤在体内不断扩大或转移形成新的肿瘤。1994年分离获得的人髓系白血病干细胞证明了肿瘤干细胞的客观存在，之后又相继从乳腺癌、脑肿瘤和前列腺癌组织中分离并培养出各种肿瘤干细胞，证实了实体肿瘤干细胞的存在。 二、胃干细胞、炎性反应与胃癌的发生 胃干细胞是具有自我更新和复制能力的原始细胞，属于成体干细胞，通过向祖细胞分化。进一步分化形成胃的各种腺体细胞，维持胃黏膜更新及组织内环境稳定。由于缺乏特异性标志和理想的分离纯化技术，故目前对胃干细胞的研究较少。有研究证实G蛋白偶联受体(Lgr5)表达于胃腺体底部细胞中，通过分化细胞学示踪实验发现，胃腺体细胞均来自于Lgr5阳性的细胞。另有研究通过结合转基因技术和绿色荧光蛋白示踪技术，成功示踪了数量极少的胃祖细胞，这些细胞正常情况下呈静息状态，当受到炎性刺激时，祖细胞发生对称分裂，进行数量扩增，同时还可进行不对称分裂分化为各种腺体细胞。胃干细胞受到持续的炎性刺激、自身抗体或其他因素作用时可发生肠上皮化生，此过程可能是组织细胞干细胞水平分化异常所致。胃干细胞可产生胃型和肠型细胞，胃癌表型表达的异质化反映了胃祖细胞向这两个方向分化的内在潜能。已有研究证实幽门螺杆菌通过对胃上皮干细胞的影响和作用，在慢性萎缩性胃炎向胃腺癌的转化过程中起关键作用。小鼠胃上皮祖细胞系(mGEP)能支持胃癌相关幽门螺杆菌的吸附。对感染后的mGEP进行基因芯片表达谱分析显示。mGEP代谢和信号传导路径发生改变，氨基酸代谢的免疫过氧化物酶抗体路径(IPA)表达上调，多胺合成相关的限速酶鸟氨酸脱羧酶1(Odel)表达明显上调，该酶与胃肠型化生及慢性胃炎到胃癌的转化相关；抗酶抑制剂(Azinl)的表达亦显著上调。该蛋自在人胃癌组织中高表达，并与Odcl的表达量和活性相关。慢性炎性刺激使得胃上皮干细胞发生转化进展，促进肿瘤形成和进展。有研究称肿瘤为“不可治愈的炎性反应。慢性炎性反应能刺激组织细胞过度增殖，出现偶发的有丝分裂错误和突变，炎性反应能促进肿瘤生长和进展。幽门螺杆菌感染胃黏膜上皮后能诱导活性化胞苷脱氨酶(AID)基因表达，该基因与免疫球蛋白的转换及B淋巴细胞的超突变有关．若该基因表达于肿瘤中．则与p53抑癌基因的点突变有关。可能与胃癌发生有关。干细胞通过不对称分裂产生子代原始干细胞和定向干细胞．在慢性炎性反应环境中，当受到致癌因素或促癌因素作用后。基因组稳定性发生改变、基因表达失控，原始干祖细胞增殖和转化成为肿瘤干细胞。因干细胞在癌变过程中的不同阶段呈现出不同的形态，加之致癌因素及癌变过程的多样化，最终发生的胃癌呈现不同的形态和生物学行为。 三、胃癌干细胞存在的理论与证据 目前分离肿瘤干细胞的主要方法为流式细胞技术。急性粒细胞白血病干细胞的细胞表面特异性标志为CD34+CD38一Thy-1。乳腺癌干细胞的细胞表面特异性标志为ESA+Lin—CD44+CD24一／low。胰腺癌干细胞的细胞表面特异性标志为CD44+CD24+ESA+。脑肿瘤干细胞的细胞表面特异性标志为CDl33+。前列腺癌干细胞细胞表面特异性标志为CD44+CDl33+整合素α2β1+。在结肠癌细胞中也发现了一些细胞表面标记为CDl33+的细胞．其所占比例很小，但增殖能力很强，经连续移植传代后仍能分裂、增殖、分化．并能保持其异质性。现仍有一些器官中尚未找到确切的相关肿瘤干细胞，胃癌就是其中之一，但有证据可初步证明其存在。现 有的肿瘤干细胞鉴定方法包括以下两个方面。利用肿瘤干细胞的生物学特性，在体外培养后进行初步鉴定：判断体外培养的肿瘤干细胞是否呈悬浮球状生长、是否具自我更新和增殖能力、是否具多向分化潜能并可连续传代。在仅含上皮生长因子(EGF)和基本成纤维细胞生长因子(bFGF)的无血清培养基中，通过有限稀释实验和亚克隆培养分析发现。所有亲本肿瘤球制成的细胞悬