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成年大鼠海马神经干细胞移植治疗脑出血的研究

第3 7 卷第 1 期 温 州 医 学 院 学 报 Vol.37 No.1 第23070卷7 年1 月 Journal of Wenzhou Medical College Jan第.2010期7 ·论 著 · 成年大鼠海马神经干细胞移植治疗脑出血的研究 1 1 2 1 1 张弩 ,周辉 ,杨林 ,林坚 ,尹波 (1.温州医学院第二附属医院 神经外科,浙江 温州 325027;2.华中科技大学同济医学院附属协和医 院 神经外科,湖北 武汉 430022) [摘 要]目的:探讨成年大鼠海马神经干细胞 (NSCs)对脑出血的移植治疗作用。方法:从成年SD大鼠的 海马中分离、培养、鉴定NSCs,制作大鼠脑出血模型,将BrdU标记的NSCs注入到血肿同侧的尾状核内。 不同时间处死大鼠,通过免疫组织化学分析NSCs在体内的分化情况。结果:经Nestin染色证实能从成年 大鼠的海马中分离出NSCs,通过免疫组织化学证实移植的NSCs能在出血区分化为神经原和神经胶质细胞。 结论:移植的NSCs在大鼠脑内血肿周围能够成活。 [关键词] 神经干细胞;脑出血;移植 [中图分类号] R651.105[文献标识码] A [文章编号] 1000-2138(2007)01-0033-03 Study on transplantationof ZHANG Nu,ZHOU Hui,YANG Lin,et al. Department of Neurosurgery,t Wenzhou Medical College,Wenzhou 325027 Abstract:Objective: on the cerebral hemorrhage. Methods: rats,neural stem cells in vitro, ,Rats were killed at different time, was checked by immunohistochemistry. Results: NSCs could be isolated from the hippocampus, Conclusion: Key words:neural stem cells;cerebral hemorrhage;transplantation 近年来,以胚胎来源的神经干细胞移植治疗脑 分离克隆传代一次。将第二代成年大鼠海马神经干 出血的研究已有报道,但来源于成年的却少见报 细胞用神经干细胞培养液加入MTT(四甲基偶氮唑 道,本研究通过对大鼠脑出血模型进行成年神经干 蓝)液,置于37℃、5%CO培养箱中孵育4 h,然 2 细胞移植治疗,了解出血部位移植神经干细胞的生 后再加入150μl二甲基亚砜,震荡5~10 min,充 长情况,现作如下报告。 分溶解细胞代谢产物。在酶标仪于590 nm波长测 其光密度值,了解其活性。第三代细胞大部分继续 1 材料和方法 培养3 d,少量的神经球,将其移入辅有L- 多聚赖 1.1神经干细胞的分离、培养和鉴定 成年雄性 氨酸的盖玻片上,培养液为含有10%胎牛血清的 大鼠腹腔麻醉后处死,常规消毒、剥除颅骨及脑 DMEM/F12。3 d后,予丙酮固定。应用nestin抗 膜,将大

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