酮康唑经糖尿病和正常大鼠皮肤体外透过性差异比较.doc

酮康唑经糖尿病及正常大鼠皮肤的体外透过性差异比较 作者:陈伟光等 [摘要] 目的 比较酮康唑经糖尿病和正常大鼠皮肤体外透过性的差异。 方法 利用扩散池（Franzcells）技术对临床常用的抗真菌药物酮康唑进行研究，将其制成凝胶剂、乳膏剂和软膏剂，比较其经糖尿病和正常大鼠皮肤的渗透吸收差异。 结果 酮康唑乳膏经糖尿病皮肤透过速率大于正常组，且糖尿病模型组与正常组之间差异有统计学意义（P0.05）。 结论 透过性差异的产生与糖尿病状态下皮肤自身的改变有关。 　　[关键词] 酮康唑；糖尿病；皮肤体外透过性 　　[中图分类号] R587.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）09（c）-0007-03 　　糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由多种病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢紊乱，可引起患者多系统损害，是由遗传原因和环境因素作用而累及全身，需要长期治疗、困扰全球的慢性代谢性疾病。糖尿病易引起皮肤损害，临床表现多种多样，局部外用酮康唑药物后，受损皮肤很可能影响药物的吸收，故糖尿病人对这些药物的渗透及经皮吸收与正常人相比理论上应该是有差异的。本文采用正常及糖尿病大鼠的皮肤对酮康唑外用制剂进行体外扩散实验，比较药物的透过性是否发生了改变，报告如下。 　　1材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，SPD-20AT检测器；TK-20A型药物透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）。酮康唑对照品（中国药品生物制品检定所，批号100294-200602），酮康唑原料药（纯度≥99%，广州越迪化工有限公司分装），高效液相试剂甲醇为色谱纯，凝胶剂、乳膏剂、软膏剂基质辅料等其他试剂均为分析纯[1]。 　　1.2实验动物 　　正常SPF级雄性Wistar大鼠，体重（230±10）g，由南方医科大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK（粤）2006-0015。实验动物室温度（22±2）℃，相对湿度（50±5）%，光照/黑暗12 h交替，环境安静，给予普通饲料和清洁饮水。糖尿病大鼠常规饲料喂养2周，第2周末对其禁食12 h，于次日清晨测空腹血糖的浓度，剔除血糖过高（6 mmol/L）或偏离正常值较大的动物，称重，给予大鼠腹腔注射0.1 mol/L（pH 4.4）枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液溶解的1%链脲菌素造模，注射剂量40 mg/kg，正常对照组大鼠单次腹腔注射等容量的0.1 mol/L（pH 4.4）枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液。注射1周后，用血糖仪测尾尖血糖，以血糖16.7 mmol/L作为糖尿病成型标准[2]。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 大鼠分组 　　取36只正常对照组大鼠，随机分为6组，每组6只，分别为酮康唑凝胶-正常对照组、酮康唑乳膏-正常对照组和酮康唑软膏-正常对照组；酮康唑凝胶-糖尿病模型组、酮康唑乳膏-糖尿病模型组和酮康唑软膏-糖尿病模型组。 　　1.3.2 酮康唑凝胶、乳膏、软膏及其供试品的制备 　　1.3.2.1 酮康唑凝胶制备 酮康唑2 g，羟丙基甲基纤维素（HPMC）2 g，无水乙醇45 ml，甘油10 g，氮酮1 g，亚硫酸钠0.1 g，水39.9 g，制成100 g。将酮康唑溶解在乙醇-水溶液，水浴（不超过70℃）加热溶解，放冷后，再加入处方量的甘油、氮酮、抗氧剂，加水适量，再缓缓加入羟丙基甲基纤维素醚（HPMC），边加边搅拌，加水至100 g，最后放置过夜，使其充分溶胀，混合均匀、细腻，得到凝胶剂。 　　1.3.2.2 酮康唑乳膏制备 酮康唑原料药2 g，硬脂酸10 g，单硬脂酸甘油酯5 g，液体石蜡14 ml，白凡士林5 g，甘油5 g，十二烷基硫酸钠（SDS） 0.1 g，三乙醇胺0.35 g，蒸馏水61.6 mL，制成100 g。将酮康唑原料药用适量甘油研成糊状，备用。将油相（硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、液体石蜡、白凡士林）置水浴中加热熔化，调节温度在80℃，保温；将水相（SDS、甘油、三乙醇胺，蒸馏水）加热至80℃，使温度保持在80℃（略高于油相）。将水相缓慢加入油相中，按同一方向边搅拌，直至60℃左右，再将其加到酮康唑与甘油混合物中，继续搅拌，至冷凝即可。 　　1.3.2.3 酮康唑软膏制备[3] 酮康唑原料药2 g，丙二醇5 g，聚乙二醇4000 30 g，聚乙二醇400 60.5 g，无水亚硫酸钠0.2 g，蒸馏水2 g，制成100 g。将酮康唑与丙二醇调和成均匀的糊状，然后将聚乙二醇4000加入聚乙二醇400中，加热至85℃使其全部溶解后，放入40℃以下水浴中搅拌，加入预先用丙二醇调好的酮康唑，和用蒸馏水溶解好的无水亚硫酸钠，搅拌均匀即可。 　　1.3.3 PBS（pH7.4）缓冲液的制