《普济方》肿瘤药物抑制肿瘤配伍比例探究.docVIP

《普济方》肿瘤药物抑制肿瘤配伍比例探究摘 要：目的：观察《普济方》中治疗积聚类疾病所用频次最高的中药大黄、当归、木香的不同配伍对Lewis肺癌荷瘤小鼠抑瘤作用的影响，探讨大黄当归木香的最佳配伍关系。方法：制备Lewis肺癌荷瘤小鼠动物模型，随机分为模型组、大黄组、大黄当归组、大黄木香组、大黄当归木香组；通过测定荷瘤小鼠的瘤重，计算抑瘤率，观察不同配伍组对肿瘤生长及对免疫功能的影响。结果：大黄当归组对Lewis肺癌的抑瘤率达到78.52%，脾指数(2.349±0.58)mg/g，与模型组比较，具有统计学意义(P95%)，用生理盐水l500r/min 5min离心清洗2次，再以生理盐水进行稀释。用0.5%台盼蓝溶液染色后于血球计数板计数，如果光镜下细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。取干净的计数板，置于水平的显微镜载物台上，盖上盖玻片，使两侧各空出少许。摇匀腹水细胞悬液，用移液器吸取20μL，将移液器尖轻轻置于盖玻片边缘外，让滴出的细胞悬液凭毛细管作用吸入计数室内，刚好充满计数室为宜，然后在光镜下观察，将癌瘤细胞悬液调整稀释至1×10?7 个/mL，活细胞率95%，按0.2mL/只接种于小鼠左前肢腋部皮下，整个操作过程保证无菌、快速。 1.2.2 分组 随机分为模型组、大黄组、大黄当归组、大黄木香组、大黄当归木香组，每组均为12只。 1.2.3 药液制备 按实验分组的设计要求，每组用药按大黄15g，当归20g，木香10g的剂量组方。3味药均粉碎，水浸泡30min，当归先煎40min，再下大黄、木香，煎30min后滤液并浓缩至大黄当归组含2.92g/mL生药、大黄木香组含2.1g/mL生药、大黄组含1.25g/mL生药、大黄木香当归组含3.75g/mL生药。每日每只一次灌胃0.4mL/次，日灌胃量相当于成人每日口服剂量的10倍，模型组每日以等量的生理盐水灌服。 1.2.4 处理方法 小鼠接种Lewis肺癌[1-2]细胞24h后开始给药，实验周期参照并综合文献记载，于用药后第14天行颈椎脱臼处死小鼠，摘取各组小鼠的瘤块并分别称重。 1.3 统计学方法 用SPSS软件进行统计分析，对各组数据进行t检验，显著性界值定为0.05。所有数据以均数±标准差(±s)表示。 2 结 果 见表1。 抑瘤率=(对照组平均瘤重-用药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100% 脾指数=脾重(mg)/体重(g)×100% 大黄当归组对Lewis肺癌抑瘤率达到78.52%，与模型组比较，在统计学上具有显著性差异(P大黄木香当归组大黄组大黄木香组，与抑瘤作用强度的趋势大黄当归组大黄木香当归组大黄组大黄木香组基本一致，因此可以认为各组小鼠免疫功能状态的不同是本实验各组抑瘤作用不同的主要原因之一。 参考文献 [1] 任美萍，钟琳，肖顺汉.中药抗肿瘤机制研究近况[J].四川生理科学杂志，2006，28(4)：168-170. [2] 周彩虹， 林洪生，黄启福，等.中药金安粉针剂对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及其机制探[J].中国病理生理杂志，2003，19(5)：672-675. [3]曹舫，袁秉祥.脑瘤消胶囊对艾氏腹水癌小鼠的抗肿瘤作用[J].现代肿瘤医学，2004，12(6)：514-515. [4] 唐小江，祝寿芬.山大黄多糖的抗肿瘤及免疫增强作用[J].中药药理与临床，1999，15(4)：15. [5] 刘庆，张彦博，马传红. 原发性肝癌的中医治法与方药[J].中西医结合学报，2005，4：260-262. [6] Kim YK，Kim YS，Ryu SY.Antiproliferative effect of furanocoumarins from the root of Angelica dahurica on cultured human tumor cell lines[J]. Phytother Res，2007，21(3)：288-290. [7] 刘宇炜， 文若剑，易卉玲.高温和当归联合作用对HeLa细胞周期的影响[J]. 中华中西医杂志，2005，6(21)：5. [8] 刘景田，党小军，王惠萍，等.中药多糖对红细胞膜相CD35免疫活性的调节作用[J].中国现代医学杂志，2002，12(1)：7. [9] 毕爱华.医学免疫学[M].北京：人民军医出版杜，1995：240. 1