己烯雌酚对体外培养正常人表皮黑素细胞作用.docVIP

己烯雌酚对体外培养正常人表皮黑素细胞作用[摘要]目的:观察不同浓度外源性雌激素己烯雌酚（Diaethylstilbestro，DES）对体外培养人正常黑素细胞的细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响。方法:采用MTT法测定黑素细胞增殖情况，参考Nakajima M方法测定酪氨酸酶活性。结果:不同浓度己烯雌酚对体外培养人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性均有促进作用。结论:己烯雌酚能促进人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性，对相关皮肤色素性疾病可能有一定的治疗作用。 [关键词]己烯雌酚；黑素细胞；酪氨酸酶 [中图分类号]R329.25[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2008）05-03 Effects of Diaethylstilbestro（DES） on cultured human melanocytes in vitro GONG Shi1, ZHANG Qing2, ZHAO Zhi-Guo2,lIU Qiao 1,CHENG Yong-jun1,WANG Ai-min1,YANGXian-xiu1 ,CHEN Kang1 (1.Department of Dermatology,Hai nan Provincial Skin Disease Hospital,Haikou, 570206 Hainan,China; 2.Department of Pharmacology, Guiyang Medical College) Abstract: ObjectiveEstablishing the culture of human normal melanocytes in vitro,and studying the effects ofDiaethylstilbestro（DES） on cultured human melanocytes. MethodsViability of melanocytes were measured by MTT method;tyrosinase activity was measured by utilization of L-Dopa as the substrate(Nakajima M.method ). ResultsDifferent dosage ofDiaethylstilbestro（DES）induced a strong promotion on melanocytic viability and tyrosinase activity. Conclusion Diaethylstilbestro（DES）can promote melanocytic proliferation and tyrosinase activity. Diaethylstilbestro might have some therapentical effects on correlated pigmented skin diseases. Key words: Diaethylstilbestro（DES）; Melanocytes ;Tyrosinase 早期研究观察到外源性雌激素局部和系统使用均能引起人类皮肤色素沉着。SD-McLeod等[1]早在1994年就证实内源性雌激素能促进体外培养人表皮黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性，最近的细胞免疫化学研究也证明了成人包皮来源体外培养的黑素细胞可表达雌激素受体[2]。多年来，雌激素对人表皮黑素细胞作用的研究主要是围扰内源性雌激素，且随着雌激素皮肤受体的精确定位，逐步证实大部分与雌激素受体结合的配基（包括外源性雌激素）有很相似的结合构象。另有报道称人工合成的己烯雌酚（Diaethylstilbestro，DES）极易与体内雌激素受体蛋白结合，具有比天然雌激素更强的基因表达[3]。因此本实验利用体外培养的正常人表皮黑素细胞，研究了外源性雌激素―己烯雌酚对体外培养人黑素细胞的增殖及酪氨酸酶活性的影响，拟证实外源性雌激素（DES）的活性，为进一步理解内、外源性雌激素活性异常所造成的皮肤病理过程提供参考。 1材料和方法 1.1试剂：己烯雌酚1ml：2mg（针剂规格，上海通用药业股份有限公司，批号：，黑素细胞培养液（美国Cascade公司产品），DispaseⅡ酶（瑞士Roche公司产品，购自第三军医大学），左旋多巴（L-dopa，Sigma公司产品），噻唑蓝（MTT），二甲基亚砜（DMSO），TritonX-100（购Sigma公司）。 1.2 仪器：OLYMPUS倒置显微镜(CK40),Thermo-forma CO2孵箱，Eppendorf-5810R低温离心机，美国B