姜黄素对人肺腺癌A549-DDP细胞增殖活性的影响.docVIP

　　姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响 【摘要】 　　目的： 探讨姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响. 方法： 采用细胞计数法绘制亲代A549和A549/DDP细胞生长曲线，MTT法测定A549/DDP对顺铂的耐药指数以及姜黄素对A549/DDP细胞抑制率. 将不同浓度姜黄素作用于A549/DDP细胞24 h后，Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞核形态，流式细胞仪检测细胞凋亡率. 以20 μmol/L的姜黄素作用细胞24 h后，流式细胞仪分析细胞周期. 结果： 亲代A549细胞和A549/DDP细胞的生长曲线相似，倍增时间分别为（33.24±0.24）h和（32.88±0.11）h（P＞0.05）；顺铂处理A549和A549/DDP细胞72 h后，半数抑制浓度 （IC50）分别为13.57 μmol/L和146.79 μmol/L，A549/DDP细胞对顺铂的耐药指数为10.82. 姜黄素对A549/DDP细胞增殖有抑制作用，并且呈时间浓度依赖性（P＜0.05）. 姜黄素作用后，Hoechst染色显示A549/DDP细胞核缩小变形，致密浓染荧光成团块分布. 流式细胞仪分析结果示细胞凋亡率呈明显剂量依赖关系（P＜0.05）. 20 μmol/L的姜黄素作用细胞24 h，引发G2期阻滞. 结论： 姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖.其作用可能是通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡来实现的. 【关键词】 姜黄素；肺肿瘤；A549/DDP细胞；细胞凋亡；细胞周期 【Abstract】AIM: To explore the effect of curcumin on proliferation of human lung adenocarcinoma cell line A549/DDP. METHODS: Cell counting in easured by MTT assay. After the cells in, cellular morphology icroscope. Cell cycle analysis and apoptosis rate etry. RESULTS: The cell groilar to that of A549/DDP cells. The doubling generation time of A549 cells and A549/DDP cells ent ol/L and 146.79 μmol/L, respectively, in on A549/DDP cells edependent manners (P＜0.05). Under fluorescence microscope, cells treated in shoerated. The apoptosis rate of A549/DDP cells induced by curcumin arkably higher than that of the control cells, and cell cycle analysis shoin exerts inhibitory effects on proliferation of A549/DDP cells in dosedependent and timedependent manners possibly through inducing cell cycle arrest and cell apoptosis. 【Keyin; lung neoplasms; A549/DDP cell; apoptosis; cell cycle 　　0引言 非小细胞肺癌（non small cell lung cancer, NSCLC）早期多无症状，就诊时患者疾病已属晚期，因此治疗上多采取以化疗为主的综合治疗. 顺铂（cisplatin, DDP）具有广泛的抗瘤谱，是NSCLC化疗方案中的一线药物. 但随着晚期肺癌患者化疗的开展，DDP的获得性耐药问题日益严重，制约了其疗效的发挥. 姜黄素（Curcumin, C12H36O5, FTT），二甲基亚砜（DMSO），胰酶均为美国Sigma公司产品；DDP为山东齐鲁医药有限公司产品；Hoechst33258染色试剂盒为碧云天公司产品；PI和Annexin VFITC均为BD公司产品；RPMI1640培养基为Gibco公司产品；胎牛血清为杭州四季清公司产品；其余试剂均为国产分析纯. 姜黄素用DMSO溶解配制成终浓度为40 mmol/L的母液，过滤除菌，避光存储于-20℃备用，每次实验前用培养液稀释至所需浓度（DMSO终浓度lt