KLF6在肝细胞癌中的表达缺失及其对肝癌细胞增殖的影响.PDF

· 132· 实验研究 KLF6在肝细胞癌中的表达缺失及其 对肝癌细胞增殖的影响 王少平 亢黎莉 陈孝平 周鹤俊 隋玉军 司文章 【摘要】 目的研究潜在抑癌基因KLF6在肝细胞癌的表达、变异及对肝癌细胞增殖的影响， 探讨KLF6基凶在肝细胞癌中的作用机制。方法分别用荧光定量PCR、Western—Blot和DNA直 接测序、荧光标记多态性微卫星分析，检测肝细胞癌中KLF6基因的表达及变异情况；构建野生型 KLF6真核表达质粒pcDNA3．0／KLF6，转染肝癌细胞HepG2，观察转染后细胞生长情况。结果 KLF6基因在肝细胞癌的表达明显下调(Po．01)。在21例肝癌组织中的突变率为29％。3个错义 突变——Y97C、T145A和T147A均位于KLF6蛋白活性域的非保守氨基酸序列，而配对癌旁组织 423 A—G)破坏r脯氨酸蛋白激酶的磷酸化作用位 均未发现突变。其中，错义突变一T147A(base 点(XTPX*)。微卫星分析KLF6在肝细胞癌表现出较高频率的杂合子缺失，缺失率为52％。在出 现杂合子缺失的11例样本，KLF6基因均有明显的表达下调。其中，9例样本同时检测出突变。导 人外源KLF6基因可明显抑制转染细胞HepG2生长(42．7％，P0．05)。实验还发现，pcDNA3．O／ KLF6基因可能为新的肝癌相关抑癌基 KLF6转染HepG2细胞后，可诱导转染细胞凋亡。结论 因，在肝细胞癌病理演变过程中可能扮演重要角色。 【关键词】癌，肝细胞；抑癌基因}KLF6f基因表达； 细胞增殖 its eelI Lossof ofwtKLF6in carcinomaandeffectOlll carcinoma expression hepatocellular hepatocellular WANG Li—li，cHEN Yu—jun， proliferationShao—ping’．KANG Xiao-ping，ZHOUHe—jun，SUI Sl General Universi— AffiliatedHospitalofShaoxing We7l—zhang．’Departmentof Surgery，the 312000。P．R．China ty．Shaoxing author：WANG CDrrPs户。竹di行g Shao-ping，Email：wangspb@126．com To the and alterationsofKLF6in [Abstract]Objectiveinvestigateexpressiongenetic hepato— cellularcarcinoma(HCC)andtheirfunctionalmechanismsinthe and explore oncogenesisdevelopment ofHCC．MethodsReal—time andLOH wereusedtO quantitative-PCR，directsequencing approaches in had2 and detectKLF6 abnormalitiesHCC．The genetic experimentgroups，anexperimentalgroup a the