维生素C对大鼠缺血再灌注肾组织MMP2表达的影响.docVIP

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维生素C对大鼠缺血再灌注肾组织MMP2表达的影响.doc

  维生素C对大鼠缺血再灌注肾组织MMP2表达的影响 :马尘超 陈永昌 贾俊海 臧璇 何悦成 姜蓉瑛 衣慧婷 李铁锋 【摘要】 目的: 观察维生素C(VitC)对大鼠肾脏缺血再灌注(RIR)基质金属蛋白酶2(MMP2)表达的影响,探讨其对RIR损伤保护的机制。方法: 48只雄性大鼠随机分成假手术组、RIR组和VitC组,比色法测定各组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平及肾组织丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;HE染色观察肾组织病理变化情况,并进行中性粒细胞计数;免疫组化法观察肾组织MMP2蛋白表达。结果: 与RIR组比较,VitC组血清BUN,Scr水平,肾组织匀浆MDA,LDH水平以及中性粒细胞计数均显著下降,而SOD活性显著升高;肾组织病理切片镜下显示RIR组大量肾小管结构缺损,变性,出血,坏死,VitC组较RIR组肾小管病变减轻明显;VitC预处理后,MMP2表达较RIR组肾小管显著减少。结论: 肾脏缺血再灌注时,MMP2参与介导了中性粒细胞对肾组织的浸润和自由基的活化,VitC可能通过降低MMP2在肾组织中的表达而减轻肾脏缺血再灌注损伤。 【关键词】 肾脏缺血再灌注损伤; 维生素C; 基质金属蛋白酶2 [Abstract] Objective: To observe the changes of vitamin C(VitC) on the expression of MMP2 in rat after renal ischemia reperfusion(RIR) injury in order to elucidate the mechanism of its protective effect. Methods: Forty eight SD male rats ly divided into 3 groups: the sham operated(sham) group, the RIR group and the VitC group. The level of serum creatinine(Scr), blood urea nitrogen(BUN), the activity of renal SOD, LDH, and the content of MDA ber of neutrophil(N) munohistochemical method. Results: In parison ber of N, any renal tubules, hoatically in the VitC group. Conclusion: The adhesion of neutrophil to kidney and the activation of free radicals could be mediated by MMP2, and VitC may alleviate renal ischemia reperfusion injury through decreasing the expression of MMP2. [Key ia reperfusion injury; vitamin C; matrix metal proteinase2 肾缺血再灌注(renal ischemiareperfusion, RIR)是临床常见的病理生理变化,常见于急性失血或中毒性休克、肾脏手术及肾移植术等过程中,其最主要的组织学变化表现为肾小管坏死或凋亡,细胞外基质(extracellular matrix, ECM)降解和间质中炎性细胞的浸润[1]。基质金属蛋白酶(matrix metal proteinases, MMPs)是一类含锌的可降解细胞外基质中多种蛋白成分的内肽酶家族,在许多生物活性物质(如细胞因子、自由基等)刺激下可异常表达,参与急性心肌梗死[2]、扩张型心肌病[3]、心力衰竭[4]等多种病理生理过程,造成基质破坏和血管通透性增加。近年来有人在对大鼠脑和心肌缺血再灌注的研究中发现MMPs参与了缺血再灌注损伤,但MMPs在肾脏缺血再灌注损伤后表达和活性的变化在国内还罕见报道。本实验拟通过观察MMP2在大鼠肾脏缺血再灌注的表达,以及维生素C(VitC)对其的影响,试图阐明VitC对肾脏缺血再灌注损伤保护作用的机理。 1 材料和方法 1.1 主要药品和试剂 尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒均购自南京建成生物研究所;VitC注射液由南京金陵制药厂生产;MMP2抗体、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒均购于武汉博士德生物有限公司。 1.

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