稻秆降解复合菌系的筛选及其发酵特性的分析研究.pdfVIP

摘要 摘要 以秸秆为原料进行沼气发酵是推动产业沼气发展的重要途径，然而秸秆中的木质纤维素 结构复杂、不易被微生物降解，严重制约了秸秆沼气的发展。木质纤维素的水解酸化是秸秆 沼气发酵的限速步骤，如何实现木质纤维素的高效水解酸化一直是困扰研究学者的难题。关 于木质纤维素降解菌的研究有很多报道，但多数存在酶系组成单一、纤维素降解率低、发酵 温度要求过高的问题，不适合高寒地区沼气工程的运行。本研究从黑龙江省内富含腐草的多 处特殊地理环境中取样，利用微生物之间天然形成的协同关系，在中温35。C条件下，筛选驯 化能够高效降解木质纤维素的复合菌系，探讨其形态特征、生长特性、稻秆降解和产酸能力。 主要研究内容和结果如下： l筛选构建木质纤维素降解复合菌系 以稻秆为主要碳源，从富含纤维素的土壤中分离得到一组高效稳定降解稻秆的复合菌系 LZF．12，经过四十多次的传代培养，该复合菌系的群落组成和降解性能趋于稳定。该复合菌 系6天内即可将滤纸完全降解，7天即可软化稻秆。光学显微镜和扫描电镜显示LZF．12菌 群组成比较复杂，从外观形态来看，粗细、长短不一，杆菌占主要的比例，其中夹杂着少量 的球状菌、梭状菌和哑铃状菌等。 2LZF．12的生长特性研究 通过测量分析LZF．12的生长曲线和DO曲线，发现该复合菌系由好氧菌株和微好氧菌 株构成，好氧菌通过消耗培养基中的溶解氧为微好氧菌营造适宜环境，而木质纤维物质的降 解主要依靠微好氧菌。不同初始pH值条件下，复合菌系发酵过程的环境pH值变化趋势基本 一致，表明该菌系对环境的pH值具有较强的缓冲调节能力。 3LZF．12的发酵性能研究 在监测稻秆被降解过程中的粗纤维变化时，发现复合菌系先利用稻秆中的半纤维素，然 后开始降解纤维素，木质素在整个过程中被降解较少，到发酵结束时，稻秆总失重率为66％。 液相末端产物VFAs(挥发酸)浓度在整个过程中先增大后减小，在第6天左右达到峰值， 为3．449／L，其中，乙酸与丁酸之和占到90％以上，丙酸含量较低，为下步的接甲烷菌产沼气 反应提供了适当的底物。 4碳氮比对LZF．12发酵过程的影响 比较不同稻秆预处理方式对其降解的影响，结果显示1％氢氧化钠处理稻秆是一种经济 有效的预处理方式。文中比较了五个碳氮比(即5：1，7：1，10：I，15：1，20：1)下发酵液中微 生物浊度、pH值、稻秆降解率、VFAs变化，结果显示：碳氮比越低，培养基中氮源相对丰 富，微生物量越大，稻秆的降解率也越大，相应的发酵产物VFAs产量也越高。因此，低的 碳氮比利于复合菌系LZF．12降解稻秆产酸。 5DGGE监测发酵过程中群落动态 优势菌群有Clostridium DGGE分析显示，复合菌系LZF．12中微生物种类较多， sp．、 UnculturedVerrucomicrobia和Clostridium cellulolyticum。有资料显示这几类菌群具有较强的 东北农业大学工学硕士学位论文 降解木质纤维素的能力，对于稻秆的降解起到了关键作用；此外，复合菌系中还含有 Pseudomonas Acidithiobacillus sp．、Acetivibriosp．、Uncultured sp．和Unculturedeubacterium等 微生物种群，它们能发酵碳水化合物产生包括乙酸、丁酸、甲酸等的混合酸，形成了复合菌 系以挥发酸为主要发酵产物的代谢途径。 关键词复合菌系；木质纤维素；挥发酸；降解特性；菌群动态 II Abstract Researchon ofRiceStraw Screening Degradation MicrobialandItsFermentat