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慢病毒载体体外转染鸡胚原始生殖细胞研究
农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (4): 612~616
·研究论文 ·
慢病毒载体体外转染鸡胚原始生殖细胞 *
丁红梅 ， 徐世永 ， 邵根宝 ， 孙 岩 ， 王 蒙 ， 刘红林 **
(南京农业大学动物科技学 院， 南京 210095)
： 28 ( ) (PGCs) ， 并对 PGCs
摘要 提取第 期伊萨鸡 生殖嵴原始生殖细胞 ， 将其与性腺基质细胞共培养 进行
PAS ( ) AKP( ) pL 293FT
过碘酸希夫试剂 和 碱性磷酸酶 染色鉴定 。构建 慢病毒表达载体， 与辅助质粒共转染 细胞
生产病毒颗粒 。将慢病毒浓缩后转染鸡胚 PGCs， 转染率高达 24.19%。
： ； 转染效率
关键词 鸡胚； 原始生殖细胞； 慢病毒
中图分类号: S188 文献标识码: A 文章编号: 10061304(2007)04061205
LentiviralVector Transfection ofChicken EmbryoPrimordialGerm Cells
DINGHongmei,XU Shiyong,SHAO Genbao, SUNYan,WANG Meng,LIUHonglin**
Primordial germ cells (PGCs) were isolated from the gonads of ISA brown chicken ( ) embryos at
stage 28 and PGCs were cocultured with gonadal stroma cells.Identification of PGCs was carried out by periodic acidSchiff (PAS)
and alkalinephosphatase (AKP) staining.A lentiviralvectorpL was constructed andharvestedthevirusby cotransfecting
293FT cells with the vector and packaging plasmids. Lentiviruses after concentration were used to transfect chicken PGCs, and the
transfection efficiency ofPGCswasupto24.19%..
chicken embryos;primordialgerm cells;lentivirus;transfection efficiency
， 。对
转基 因鸡 的生产成为最 近研究 的热 门领域之 %)。然而， 迄今为止 PGCs 的转染效率非常低
一。 因为鸡不仅可 以作为研究脊椎动物发育史的模 PGCs 的转染方法 主要为脂质体介导法 、逆转 录病
型 ，还 可 以作 为 生 物 反 应 器 用 来 生 产 药 用 蛋 白 毒转染法及电穿
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