耐酚优势菌细菌固定化效果研究.pdf

维普资讯 第 13卷 第 1期 茂名学院学报 V01．13 No．1 2003年 2月 JOURNALOFMAOMING COLLEGE Feb．2003 文章 号：1671—6590t2003)01—0001—06 耐酚优势菌细胞 固定化效果的研究 杨建设 ，刘文波 ，杨胜槐 (茂名学院环境工程系。广东茂名 ，5250o0) 摘 要： 应用时酚能力达 1760mg／L的优势茵种Wl、M2和w2进行了细胞 固定化效果的研究．结果表明。几种 包埋剂中机械强度和稳定性能均以海藻酸钠较好。菌种wl的适宜包埋条件为 3％浓度的海藻酸钠。包埋比为 2：25；茵种 M2和w2的适宜包埋条件为 5％浓度的海藻酸钠。包埋比为4：25。在 处理炼油废水时。采用添加营 养盐的方法，固定后的细茵 12h内降酚率可达到96．8％的生化处理效果。 关键词： 细胞固定化；海藻酸钠 ；降酚效果 中圈分类号：Q93—3 文献标识码 ：A 含酚废水来源广泛，污染严重，危害性大。对高浓度 的含酚废水 (酚含量3000mg／L)常用物理化学 结合的方法加以回收利用 1【；含酚浓度较低的废水，则实行以微生物降解处理的生化方法，其工艺常为生 物挂膜法与活性污泥法，往往存在着降解连续性差、挂膜时间长且挂膜 困难等。为解决上述 问题 ，国外将 细胞固定化技术引人含酚废水的处理工艺，取得 了相当大的进展 2【—5J。 据报道 ，常用的包埋剂主要有：琼脂、丙烯酰胺、海藻酸钠、明胶、几丁质及聚已烯醇 (简称 PvA)等。 针对废水处理的实际情况，一般认为海藻酸钠及PVA是比较合适的包埋剂。但这两种物质作为包埋剂形 成的固定化微生物的性质及适宜包埋条件的研究还不够深入。本文分别 以海藻酸钠、琼脂、PVA为包埋 剂，采用全因子实验法，以酚的去除率为主要指标，机械强度为辅助指标 ，确定其适宜的包埋条件 ，并对形 成 的固定化小球的性质差异进行 了比较 。 1 材料和方法 1．1 材料 1)供试茵 由本课题组从来源于生活污水和练油厂活性污泥在不同苯酚浓度中驯化分离得到的菌 种Wl、W2和 M2，其特性见表 3。 2)包埋剂 海藻酸钠 (工业用)；PVA(工业用)；琼脂 (生化试剂)。 3)交联剂 CaCh(分析纯，广州化学试剂厂)；硼酸(分析纯，广东台山化工厂)。 4)茵体扩繁用的培养基 KH2PO40．5g；K2HPO40．5g；MgSO47‘H2O0．2g，(Cl20．1g，NaC10．2 g，MgSO4·H20痕量 ，FeC122滴 ，NI-I4NO3lg；苯酚 ，按需要浓度称取 ；溶液用 10％NaOH调 pH值为 7．5， 灭菌备用。 1．2 方法 收稿 日期 ：2002—11—10；修 回日期：2oo2—12—2O 基金项 目：茂名学院博士启动基金 作者简介 ：杨建设 (1957一 )。男，山西永济人 。博士。教授 维普资讯 2 茂名学院学报 2003年 1)细菌扩繁 称量约为 1．7g苯酚放于蒸馏水中摇匀，按 1．1．4所示配方制成含 1760mg／L苯酚浓度 的 1L培养液。取 Wl、Mz和 w2三个菌种分别按 1：10的菌液 比例接种各 350ml。把培养液烧杯放到 30℃的震荡恒温箱里培养。 检查：经 24～36h培养后，将培养与不培养的三角瓶同时取出，摇匀，分别吸取 0．5mL液体放入试管 中，按顺序加人下列试剂 ：4md／LNI-hOH 1滴，2％4一氨基安替匹林 1滴 ，20％吐温 802滴 ，16％铁氰化 钾 2滴。观察处理后的培养液，呈红色的说明苯酚浓度很高，耐酚菌没有繁殖起来；呈微黄色的说明不含 苯酚，表示降酚菌 已繁殖，并将培养液 中的苯酚降解掉，用其作为细胞固定化的母菌材料。 2)固定化小球的制备 海藻