生物工艺学第九章生物产品分离及纯化技术.pptVIP

第在地苦末有下 目　　录 第一章　绪论 第二章　工业微生物菌种选育、制备与保藏 第三章　工业培养基及其设计 第四章　生物工艺过程中的无菌技术 第五章　生物反应动力学 第六章 发酵过程原理 第七章 生物反应器及生物工艺过程的放大 第八章 生物反应过程参数检测与控制 第九章 生物产品分离及纯化技术 第十章 生物产品工艺学及应用 第九章 生物产品分离及纯化技术 9.1概述 9.1.1生物分离过程的特点 9.1.2生物物质分离的一般步骤 9.2发酵液的预处理 9.2.1加热 9.2.2凝聚和絮凝 9.2.3调节pH 9.2.4加入价廉的无机盐类 9.2.5加入助滤剂 9.3生物物质固-液分离技术 9.3.1发酵液的过滤分离 9.3.2发酵液的离心分离 9.4微生物细胞的破碎与分离 9.4.1机械法 9.4.2非机械法 9.5生物物质的分离与提取 9.5.1沉淀法 9.5.2吸附法 9.5.3离子交换法 9.5.4萃取法 9.6生物物质纯化与精制技术 9.6.1色谱分离 9.6.2膜分离技术 9.6.3结晶技术 9.6.4生物产品的干燥 9.1概述 9.1.2生物物质分离的一般步骤 生物分离技术笼统的四步骤： 预处理和固液分离：过滤和离心操作常用于此过程。如果产物在细胞内，收集细胞后就还要进行细胞的破碎和细胞碎片的分离。 杂质粗分(初步分离)：用吸附和溶剂萃取等方法。 纯化：通常利用色谱法、膜过滤法等。 精制：获得最终产品，通常采用结晶法。大部分产品还必须进行干燥处理。 设计某一具体产品分离提取工艺时应注意： 所提取物是胞内产物还是胞外产物；产物和主要杂质的浓度；产物和主要杂质的物理化学特性及差异；产品的用途和质量标准；产品的市场价格；废液的处理方法等。 9.2发酵液的预处理 9.3生物物质固-液分离技术 9.3.1发酵液的过滤分离 在过滤操作中要求对介质选择及操作条件进行优化，才能使滤速快，滤液澄清并且有高的收率。 过滤介质选择 过滤介质除过滤作用外，还是滤饼的支撑物。它应具有足够的机械强度和尽可能小的流动阻力。过滤介质技术特性包括过滤介质所能截留的固体粒子的大小和对滤液的透过性。 过滤介质所能截留的固体粒子的大小通常以过滤介质的孔径表示。如纤维滤布所能截留的最小粒子约10μm，硅藻土为lμm，超滤膜可小于0.5μm。过滤介质的透过性是指在一定的压力差下，单位时间单位过滤面积上通过滤液的体积量，它取决于过滤介质上毛细孔径的大小及数目。 工业上常用的过滤介质主要有：织物介质(如滤布,其过滤性能受 纤维的特性、 编织纹法和线型影响)，粒状介质(如硅藻土等)，多孔固体介质(如如多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料)。 离心沉降 连续流体对它的浮力 D－粒子直径；ρS, ρ－粒子、流体密度；g－重力加速度；V－粒子体积。 由Stockes定律流体对运动粒子的粘滞力 μ－连续流体的粘度；u－粒子的运动速度；CD= 阻滞系数；A－粒子在运动方向上的投影面积。 当粒子以匀速运动沉降时有Fg=Ff，所以最终匀速沉降速度为 如果粒子在离心力场中沉降，则重力加速度g应换成ω2r，即 离心分离因数 根据分离因数的大小，可将离心机分为常速离心机f3000；中速离心机f=30000－50000；高速离心机f≥50000；超速离心机f2×105。 沉降式离心机有实验室用的瓶式离心机和工业上用的转鼓离心机，其中无孔转鼓离心机又有管式、多室式、碟片式和卧螺式等几种类型。 9.4微生物细胞的破碎与分离 9.4.1机械法 珠磨机 实验室用的研磨法，是用氧化铝作为助磨剂来制备无细胞制剂，此法简单但效率低、制备量少。 工业大规模细胞破碎采用珠磨机，它将细胞悬浮液与颗粒直径为0.45－1mm的玻璃小珠、石英砂或氧化铝一起快速搅拌或研磨，使达到细胞的某种破碎程度。这类装置的主要缺点是在破碎期间样品温度迅速升高，通过用二氧化碳来冷却容器可得到部分解决。 9.5生物物质的分离与提取 影响吸附过程的因素 吸附剂的性质:吸附剂的吸附容量主要与比表面积有关 ，吸附速度主要与颗粒度和孔径分布有关，吸附剂的机械强度则影响其使用寿命； 吸附质的性质:能使表面张力降低的物质，易为表面吸附；溶质从较易溶解的溶剂中吸附时，吸附量较少；极性吸附剂易吸附极性物质，非极性吸附剂易吸附非极性物质； 溶液pH值:影响吸附剂或吸附质的解离情况，蛋白质或酶类等两性物质，一般在等电点附近吸附量最大； 离子交换树脂的分类: 离子交换树脂由三部分构成：载体；活性基团（功