猪粪中产淀粉酶、蛋白酶菌株的筛选、鉴定与发酵条件的优化.pdfVIP

猪粪中产淀粉酶、蛋白酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件的优化 · 摘 要 随着我国养殖业规模的扩大，集约化程度的提高，养殖场废弃物带来的污染问 题越来越严重，主要包括畜禽粪便污染及臭气污染。目前，对污染问题的解决方法 主要包括两种：一种是粪便排出后的治理，主要通过堆肥技术，添加一些吸附剂， 微生物菌剂，尽快实现固体粪便无害化并资源化，减少臭气污染；另一种就是从畜 禽粪便排出源头治理，主要通过饲喂微生态制剂、酶制剂，提高畜禽消化率，减少 有害微生物在胃肠道中的定植，减少H2S、NH3、挥发性脂肪酸等臭气主要成分的产 生。 本试验主要从动物粪便，堆肥产品中利用NH3选择性培养基初步筛选出能利用 氨态氮的细菌共17株，对这17株菌的产淀粉酶能力、蛋白酶能力进行定量分析， 与传统生理生化鉴定相结合的方法进行鉴定，这4株菌分别是：枯草芽孢杆菌、嗜 热脂肪芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、屎肠球菌。并对这4株菌的耐胆盐性、耐酸性、产 酸性能、动力生长曲线等生理特性进行研究，其中，这四株菌均可以在胃肠道中存 活并保持一定活力，均可以在胆盐浓度为0．03％--一0．3％的猪小肠中存活，嗜酸乳杆 菌产酸能力较好，在培养基培养48h时的pH为4．73。 芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、嗜热脂肪芽孢杆菌(BacillUS 酸乳杆菌(Lactobacillus 株菌活菌数的显著因素，通过响应面设计对显著性因素进行分析，确定各因素的最 佳水平，并通过验证试验得出结论。各菌株优化的培养基与培养条件为： 0．0183％， (1)枯草芽孢杆菌：玉米粉1．607％，胰蛋白胨1．977％，MgS04·7H20 MnS04H20 为理论值的99．6％； 0．331％， (2)嗜热脂肪芽孢杆菌：玉米粉1．534％，豆粕粉3．169％，MgS04·7H20 MnS04-H20 为理论值的99．5％； 2．221％，吐温80 为理论值的99．8％。 基于优化的培养基条件，对枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌进行5L发酵罐扩大培 养，获得了较高的活菌数，比优化前分别提高了1．5和2．1倍。 关键词：淀粉酶；蛋白酶；枯草芽孢杆菌；嗜热脂肪芽孢杆菌；嗜酸乳杆菌；响应 面法；培养基优化 猪粪中产淀粉酶、蛋白酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件的优化 Abstract Withthe of andincreaseofintensive aquaculture expansion level，the pollution waste is causedfarm problem animalmanure and by gettingworse，including pollution ozone solution tothe of two pollution．Atpresent，the problem kinds： pollution，including oneisthefecesafter anumberof treatment,mainlybycomposting，by adsorbent，