重组超氧化物歧化酶1-3杂合酶在大肠杆菌中表达优化.docVIP

重组超氧化物歧化酶1/3杂合酶在大肠杆菌中表达优化摘要：目的获取活性高的重组SOD 1/3杂合酶。方法用含pET-SOD 1/3的工程菌诱导表达重组SOD 1/3杂合酶，通过分析SDS及SOD酶活性，考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu2+、Zn2+浓度对重组酶表达量和活性的影响。结果正交试验表明，用1 mmol/L 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）在A600 =1.2时诱导，Cu2+、Zn2+浓度分别为2.4 mmol/L，诱导温度15 ℃，诱导时间12 h，能获得高活性重组SOD 1/3，其比活性为1 681 U/mg。结论培养温度和Cu2+、Zn2+浓度是优化表达的最主要因素。降低诱导温度有利于重组酶的可溶性表达，添加Cu2+、Zn2+能促进重组酶活性提高。 关键词：超氧化物歧化酶；杂合酶；表达；优化 中图分类号：Q554文献标识码：A文章编号：1672-979X(2008)11-0008-04 Optimal Expression of Recombinant Hybrid Enzyme SOD1/3 in E. coli SONG Xiao-ling, FAN Li-qiang*, RONG Zhi-feng, ZHAO Jian*, LI Su-xia, YUAN Qin-sheng (State Key Laboratory