试验一细菌的简单染色和革兰氏染色-辽宁师范大学.PPT

辽宁师范大学生物基础实验教学中心 谢鲲鹏 （一）实验目的： 1、学习微生物涂片的基本技术 2、巩固显微镜的使用方法和无菌操作技术 3、掌握细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 （二）实验原理： 1、简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的方法。此法操作简便，适用菌体一般形态和细菌排列的观察。 2、革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram氏创立的。而后一些学者在此基础上作了某些改进。革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。 （三）实验器材 1、菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌。 2、染色剂：吕氏美蓝、结晶紫、碘液、 95%酒精、番红。 3、仪器或其他用具：显微镜、酒精灯、 载玻片、接种杯、双层瓶、擦镜纸、 吸水纸、废液缸、洗瓶等。 （四）实验方法： 1、简单染色： （1）涂片：取两块载玻片，各滴一小滴生理盐水于玻片中央， 用接种环以无菌操作分别从大肠杆菌和金黄色葡萄球菌 斜面上挑取少许菌苔于水滴中，混匀并涂成薄膜。 （2）干燥：室温自然干燥。 （3）固定：涂面朝上，通过火焰2-3次。 （4）染色：将玻片平放于玻片搁架上，滴加染液于涂片上。 （5）水洗：倒去染液，用自来水冲洗，直至涂片上流下的水 无色为止。 （6）干燥：自然干燥，或用电吹风吹干，也可以用吸水纸吸干。 （7）镜检：涂片干后镜检。 2、革兰氏染色： （1）制片：取