实验6_小篮子法测定种子呼吸速率.ppt

实验六 环境温度对种子呼吸速率的影响（p165－166） 呼吸速率的测定方法 1. 实验目的 1）学习呼吸强度的碱吸收测定方法； 2）了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。 2. 实验原理（小篮子法） 植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品呼吸速率。 呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。 Ba(OH)2 +CO2 →BaCO3↓+ H2O Ba(OH)2（剩余）+ H2C2O4→BaC2O4↓+ 2H2O 每毫升1／44 mol/l 的草酸相当于1mg CO2 3. 材料和仪器设备 1）材料： 发芽的小麦种子和煮死的小麦种子 2）仪器设备： 呼吸测定装置（小篮子）； 电子天平； 酸式及碱式滴定管。 3）试剂： 饱和Ba(OH)2溶液 1／44mol/l 草酸溶液 酚酞指示剂 4. 实验步骤 ?1）取500ml 广口瓶4个，标记为0、1、2、3号，瓶口用橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝小篮，以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。 2）称取20g死种子，放入其中的一个小篮子中；再称取3份活种子，每份20g，分别放入另外3个小篮子中； 3）分别在4个广口瓶中准确加入20ml饱和Ba(OH)2溶液； 4）将3个放有活种子的小篮子分别挂在编号为1－3的广口瓶内，盖紧瓶塞，在低温（1号，冰箱冷藏室）、室温（2号）和高温（3号，40°C）中处理，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜； 5）将放有死种子的小篮子挂在0号广口瓶内，在室温中按以上步骤处理； 6）20min后，取出广口瓶中的小篮子，加入1－2滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖； 7）用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失为止，记录空白及各个温度处理下的草酸用量（记为V0、V1、V2、V3）； 5. 数据记录与处理 结果计算与分析 ?呼吸速率v（mgCO2· g－1 fw. · h－1）： 上式中，V0：空白滴定用去的草酸量（ml） Vn：处理滴定用去的草酸量（ml） 注意事项 防止口中呼出的气体进入广口瓶！ 滴定时使用有孔的盖子，通过小孔进行滴定！ 思考题 本实验中哪些操作步骤对结果影响较大？ 实验七 种子活力的测定 （p215－218） * * 小篮子法测定种子呼吸速率 呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸氧速率或者测定放出CO2速率。前者有测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线CO2气体分析仪（IRGA）等方法。 测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收，样品用量少，且精确度高。利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。 Ba(OH)2 溶液 20min 反应时间 20ml? Ba(OH)2 V3 V2 V1 V0 草酸体积 ?高温40°C 室温? ?低温4°C 室温? 温度 ?活种子? ?活种子 ?活种子 死种子? 种子（10g） 3 2 1 0 编号 实验处理情况列表 ? ? ? ? 高温 ? ? ? ? 室温 ? ? ? 低温 呼吸速率 （mgCO2· g－1 fw · h－1） 空白与处理草酸用量差值（ml） 处理滴定草酸用量（ml） 空白滴定草酸用量（ml） 处理 v = （V0-Vn）X 草酸浓度 X CO2分子量 种子质量（g）X 反应时间（h） = （V0-Vn）X X 44 10 X 0.3 X（V0-Vn） = 44 1 60 20