14_酶促反应动力学-的多底物动力学.ppt

第二节 多底物反应及其动力学;酶反应中间物：分为两类 (1) 稳态中间物： 指酶和底物以共价键结合形成的较为稳定的中间物。可以发生双分子反应而不能自身解离。例如：某些Ser蛋白酶在催化过程中形成的酰化酶中间物 包括：共价结合的ES中间物；自由酶 (2) 过渡态复合物： 非稳定的酶中间物，本身可以单分子解离或异构化之后再解离出产物或底物。 分为: 非中心复合物：酶未完全被底物饱和 中心复合物： 酶已经完全被底物饱和， (EAB EPQ); (EA EP) ;(二) 反应机制的分类和命名 (以双底物双产物反应为例）： 1. 序列(sequential)反应机制: 酶必需与所有底物都结合之后才有产物放出。对于双底物双产物反应，必有酶-底物三元复合物形成。 根据底物及产物与酶的结合及释放是否有序分为: (1) 有序双双双底物双产物反应(ordered Bi Bi) ： A B P Q E EA (EAB≒EPQ) EQ E EA、EQ : 非中心复合物； (EAB ≒ EPQ) : 中心复合物 A：领先底物； B：随后底物; 例如：许多以NAD+或NADP+为辅酶的脱氢酶类， 乳酸脱氢酶（LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)等 NAD+ 苹果酸(MA) 草酰乙酸(OAA) NADH MA OAA E ENAD+ (ENAD+≒ E NADH) E NADH E NAD+ / NADH 形成外底物对 机制：由于底物A与酶结合后改变了酶的构象，使 原来隐蔽的B结合位点暴露， B才能结合上去。 暗示：A与B可能结合在酶的不同部位。; (2) Theorell- Chance (T-C 机制)： A B P Q E EA EQ E 第二个底物B结合及释放非常快，没有明显的三元复合物变构过程。可看作是三元复合物浓度极低的序列有序机制。 例如：马肝醇脱氢酶： NAD+ 乙醇 乙醛 NADH E ENAD+ E NADH E;(3)随机双双(random Bi Bi)： A B P Q EA EQ E （EAB≒EPQ） E B A Q P 产物从酶上的释放及底物和酶的结合无一定顺序。 少数脱氢酶和一些磷酸激酶属于该类，例如肌酸激酶: 肌酸 + ATP ? 磷酸肌酸+ ADP 机制：酶蛋白上的A、B结合位均处于暴露状态， 两者与底物的结合即互不干扰，也不互相依赖。;2 乒乓机制(Ping-Pang Bi Bi)： 各种底物全部和酶结合以前 ，已经有一种或多种底物放出，不形成三元复合物。 A P B Q E (EA≒FP) F