2.分子发光-3的.ppt

第二章;§2.４ 荧光分析法的应用;荧光分析的灵敏度比紫外-可见分光光度法高103～104.;紫外-可见分光光度计:;在光照下会发生荧光的无机化合物很少，主要利用与有机试剂形成的荧光配合物。如Al3+可与8-羟基喹啉配合。;2. 有机化合物的分析;一、概述 磷光分析法是以分子磷光光谱来鉴别有机化合物和进行定量分析的一种方法。 磷光分析法在药物分析,临床分析等领域的应用日益发展。;二、 基本原理;(二) 温度对磷光强度的影响 1. 随着温度降低，分子热运动速率减慢，磷光增强。 2. 低温磷光(液氮) 由于磷光寿命长，T1的非辐射跃迁(内转换)几率增加，碰撞失活(振动弛豫)的几率、光化学反应几率都增加，从而降低磷光强度。因此有必要在低温下测量磷光。同时要求溶剂： ①易提纯且在分析波长区无强吸收和发射； ②低温下形成具有足够粘度的透明的刚性玻璃体。 常用的溶剂： ① EPA——乙醇+异戊烷+二乙醚(2+2+5) ② IEPA——CH3I+EPA(1+10)。;;(四) 室温磷光 低温磷光需低温实验装置且受到溶剂选择的限制，1974年后发展了室温磷光。 1)固体基质：在室温下以固体基质(如纤维素等)吸附磷光体，可增加分子刚性、减少三重态猝灭等非辐射跃迁，从而提高磷光量子效率。 2)胶束增稳：利用表面活性剂在临界浓度形成具多相性的胶束，改变磷光体的微环境、增加定向约束力，从而减小内转换和碰撞等去活化的几率，提高三重态的稳定性。 利用胶束增稳、重原子效应和溶液除氧是该法的三要素。;3) 敏化磷光：其过程可以简单表示为： ;三、磷光分析仪器 在荧光仪样品池上增加磷光配件：低温杜瓦瓶和斩光片。如右图所示。 杜瓦瓶：提供低温； 斩光片：切断激发光。 斩光片的作用是利用其分子受激所产生的荧光与磷光的寿命不同获取磷光辐射。;1. 光学系统与荧光分光光度计的区别;§2.6 化学发光分析法;二、化学发光分析的基本原理 （一）化学发光反应的基本要求 化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，而使反应产物分子激发所发射的光。 任何一个化学发光反应都应包括化学激发和发光两个步骤，必须满足如下条件： (1)化学反应必须提供足够的化学能，并被发光物质吸收形成电子激发态。许多氧化还原反应具备此要求。 (2)吸收了化学能处于激发态的分子，应能释放出光子或能将能量转移给其他分子，该分子能以光的形式释放能量。;（二）化学发光效率;（三）化学发光强度与化学发光分析的依据;（四）化学发光反应类型 1. 直接化学发光和间接化学发光 　　直接发光是被测物作为反应物直接参加化学发光反应，生成电子激发态产物分子，此初始激发态能辐射光子。 A + B? C* + D C* ? C + h? 式中A或B是被测物，通过反应生成电子激发态产物C* ，当C* 跃迁回基态时，辐射光子。;　　间接发光是被测物A或B，通过化学反应生成初始激发态产物C* ， C* 不直接发光，而是将其能量转移给F，使F跃迁回基态，产生发光。 A + B? C* + D C*+F? F* + E F* ? F + h? 　　式中C*为能量给予体，而F为能量接受体。;　　2. 气相化学发光和液相化学发光 　　按反应体系的状态分类，如化学发光反应在气相中进行称为气相化学发光；在液相或固相中进行称为液相或固相化学发光；在两个不同相中进行则称为异相化学发光。;三、装置与技术;四、化学发光分析的应用 1.广泛应用于大气中O3、NO、NO2、H2O???SO2、CO等组分的检测。 2.鲁米诺—H2O2体系:可测痕量的Cu2+ 、Mn2+、Co2+、V4+、Fe2+、 Fe3+、 Ni2+、Ag+、Au3+、Hg2+等 3. 间接测定某些生物试样;五、特点;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.