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2组miniSTR复合扩增体系的建立.pdfVIP

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2组miniSTR复合扩增体系的建立.pdf

4~a Il i~ .t. αlIN J FORENSIC MEO 201 0 年第25 卷第2 期 技术交流 2 组 miniSTR 复合扩增体系的建立 王新杰1 ,许欣1. 魏金叶1 ,吕桂乎z (1.法坊市公安局.山东盖在坊 261061: 2. 山东省公安厅. 山东 济南 25仪)()I) [ 关键词1 法阪物证学i mini贸R: 复合扩.f1t体系建立; 微量、降解ONA I 文民标识码1 B [文章编号) 1∞1 - 5728(2010)02 - 0109 - 02 本文在参考文献l 川的基础上.建立了两组荧光 4C保存。 将AmpFlSIR ldentifiler 试fill盒的controlDNA 标记复合扩地体系,分别用于 13 个miniSTR 基闲庭、 9947A ( 1 ∞pglμ) 以超纯水 稀得 至 50、 25 、 1 个性别基因座的分型检验,与 miniCiler 试$1盒迸行 12.5pgl件。 了对比,并对实际案例中微量、高度降解俭材进行了 1.4 扩增产物检测及分型 检测。 扩增产物 0.6μL 加 10μL 去离子甲酸胶且 E 材料与方法 0.2μL Il.S-6∞, 95t 3min. 使用 ABI31∞A 型分析 仪进行电泳分离,光谱校正及电泳参数同 ONATyp­ 1. 1 样本和 DNA 提取 erl5™ (公安部物证核定中心)复合扩培试剂盆.收集 点数改为货)()点。 GeneMapper ID V3. 2 软件对敏掘 日常俭案中使用 Identifiler 试剂企未能正确分型 进行分析。 的微量、 高度降解 ONA 样本20 份,采用 Chelex-I∞ 法或QIAamp DNA Micro 试剂盒(QIAGEN 公司)提取 2 结果与讨论 模扳DNA。 1.2 PCR 扩蝙 miniPlex A 、 B 两组复合扩增体系在 25 pg at 均 分型正确.在 12. 5 pg 时有丢带、多带现象ö min ifiler 号|物从文献1 1φ] 分别获得、、 在50 pg 时分型正确,25 pg 时 0251338 出现丢带 、 D7S820、 018551 , FGA、D851179 、 CSfl PO、 现象。 0195253 , 0351358 、D151656、 VWA、D21 511 及性别基因 座的引物序列,组成 miniPlex A, 8 两个复合扩增体系。 20 份高度降解样本,用本文2 组扩增体系分型, 有1 8 份获得了消晰结果(图 l 、2 ) , 与 minifiler 试1111 盆 其中 l

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