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Tm值差异型不对称PCR方法的建立及其在分子诊断中的应用.pdf
第 卷 第 期 ( )
55 4 厦门大学学报 自然科学版 Vo.55 No.4
年 月 ( ) Ju.20 6
20 6 7 JournalofXiamenUniversit NaturalScience
y
: /
do 0.6043 j.ssn.0438-0479.20 5060 7
Tm值差异型不对称PCR 方法的建立
及其在分子诊断中的应用
,
1 1 1 2 3 1 1* 2*
, , , , , ,
饶华春 滕继云 刁 勇 宋沁馨 王立强 杨会勇 周国华
( , , ;
华侨大学生物医学学院分子药物研究院 教育部分子药物研究中心 福建 泉州
. 36202
, ;
南京军区南京总医院药理科 江苏 南京
2. 2 0002
, , )
中国药科大学药物分析教研室 药物质量与安全预警教育部重点实验室 江苏 南京
3. 2 0009
摘要: ,
多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链 DNA 为基础的 如何获得大量和高质量的单链靶 DNA 分子一
( ) ,
直是研究热点 以包含 基因上 个单核苷酸多态性3 SNP 的DNA 片段为研究对象 通过调整不对称扩增引物
. BRCA1
( ( , )),
碱基序列组成 端引入错配或加入锁核苷酸 使用相差 倍浓度来增加不对称引物间
5- ockednucecacd LNA 0
, ( , ) ,
Tm值差异 改进扩增条件 添加增强剂的扩增缓冲液 不同退火温度的二阶循环扩增程序 后 进行不对称扩增来产生
大量单链靶 产物 结果表明 差异型不对称 ( , )可有效提高单链
DNA . Tm
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