人麻疹病毒抗体（MVAb）试剂盒使用说明书及有关详解.docVIP

人麻疹病毒抗体（MV Ab）试剂盒使用说明书--上海谷研生物公司专业代理销售 本试剂盒仅供研究使用。 使用目的：  96T 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中麻疹病毒抗体（MV Ab）表达。 实验原理 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人麻疹病毒抗体（MV Ab）表达。用纯化的人麻疹病 毒（MV）抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中麻疹病毒抗体（MV Ab）相结合， 经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的麻疹病毒（MV）抗原结合，形成抗 原 抗体 酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转 化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与 CUTOFF 值相比较，从而判定标本中人麻疹病毒抗体（MV Ab）的存在与否。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 2 酶标试剂 3 酶标包被板 4 样品稀释液 5 显色剂 A 液 6 显色剂 B 液 标本要求 20ml×1 瓶 6ml×1 瓶 12 孔×8 条 6ml×1 瓶 6ml×1 瓶 6ml×1/瓶 7 终止液 8 阳性对照 9 阴性对照 10 说明书 11 封板膜 12 密封袋 6ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 1 份 2 张 1 个 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于20保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1 孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40l，然后再加待测样品 10l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不 触及孔壁，轻轻晃动混匀， 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。  8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50l，再加入显色剂 B50l，轻轻震荡混匀，37避光显色 15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液 50l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结： 计算和结果判定： 试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15 阴性判定：样品 OD 值 临界值（CUT OFF）者为麻疹病毒抗体（MV Ab）阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为麻疹病毒抗体（MV Ab）阳性 。 注意事项 1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。  2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 1530 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。 3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5．底物请避光保存。 6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm 7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须 注意安全。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；28℃。 2．有效期：6 个月