甲基莲心碱体外抑制人肝癌细胞增殖和侵袭的作用-中国药理学通报.PDF

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１６Ｎｏｖ；３２（１１）：１５３９～４２ ·１５３９· 网络出版时间：２０１６－１０－２０１０：２９　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１０２９．０２４．ｈｔｍｌ 甲基莲心碱体外抑制人肝癌细胞增殖和侵袭的作用机制研究 １，２ ２ ２ ２ １ 周雅君 ，时　菁 ，田　耕 ，周汉新 ，高国全 （１．中山大学中山医学院，广东广州　５１００００；２．深圳市第二人民医院中心实验室，广东深圳　５１８０００） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１６．１１．０１２ 子Ｇ蛋白，ＲｈｏＡ、ＲｈｏＣ为Ｒｈｏ蛋白的亚家族成员， 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１６）１１－１５３９－０４ 而Ｒｈｏ相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（Ｒｈｏａｓｓｏｃｉａｔｅｄ 中国图书分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ３２９．２４；Ｒ７３５．７０２．２；Ｒ９７７６ ｃｏｉｌｅｄｃｏｉｌｆｏｒｍｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＲＯＣＫ）为ＲｈｏＡ下 摘要：目的　探讨甲基莲心碱（ｎｅｆｅｒｉｎｅ，Ｎｅｆ）对人肝癌 ［４］ 游蛋白 。研究发现，Ｒｈｏ信号通路与肝纤维化的 ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞侵袭的影响和作用机制。方法　人 ［５－６］ 形成、肝癌的侵袭和转移密切相关 。本文以人 肝癌ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞体外培养，经不同浓度的甲基 肝癌细胞株ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２为研究对象，通过观 莲心碱处理后，ＣＣＫ８法检测细胞的增殖，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞体 外侵袭实验观察Ｎｅｆ对细胞侵袭能力的影响；免疫印迹检测 察甲基莲心碱对ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞增殖、侵袭 Ｒｈｏ相关蛋白的表达。结果　ＣＣＫ８结果显示，与对照组比 的影响以及Ｒｈｏ相关蛋白的表达，探讨甲基莲心碱 较，甲基莲心碱干预组抑制人肝癌 ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞 对人肝癌细胞的作用及机制，为甲基莲心碱的临床 增殖，并呈剂量 －效应关系（Ｐ＜００５）；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞体外 应用奠定实验基础。 －１ 侵袭实验显示，３ ｍｏｌ·Ｌ 甲基莲心碱明显抑制ＨｅｐＧ２和 μ １　材料与仪器 －１ Ｂｅｌ７４０２细胞的侵袭；免疫印迹结果显示，３ ｍｏｌ·Ｌ 甲基 μ １．１　细胞株　人肝癌细胞ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２均购 莲心碱作用ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞 １２ｈ后，ＲｈｏＡ、ＲｈｏＣ和 自中科院上海细胞库。 ＲＯＣＫ表达明显降低。结论　 甲基莲心碱可体外抑制 １．２　药 物 与 试 剂 　 甲基 莲 心 碱 （批 号： ＨｅｐＧ２和Ｂｅｌ７４０２细胞的增殖和侵袭，其抑制肝癌细胞的侵 －１ ０５２Ｍ４７３２Ｖ）购自美国Ｓｉｇｍａ公司，１ｍｏｌ·Ｌ ＨＣｌ 袭可能与抑制ＲｈｏＡ、ＲｈｏＣ和ＲＯＣＫ蛋白的表达有关。 －１ 溶解，制成１ｍｍｏｌ·Ｌ 的甲基莲心碱溶液，４℃