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Gene5软件中文操作手册 美国伯腾仪器有限公司北京代表处 第一章：仪器连接 1 仪器的连接：按照操作指南连接酶标仪与计算机，确保电源线和USB接口正常后，打开酶标仪。 2 仪器自检：当酶标仪与计算连接好之后，打开Gene5软件，出现欢迎界面 选择System Menu System Read ConfigurationAdd选择当前使用的酶标仪的型号和正确的Com PortTest Comm（检测连接） OK OK Close 第二章 如何编写一个检测程序 任何一次检测实验都要以相应的检测程序为基础，因此实验的第一步就是要打开一个程序（protocol），如果是第一次编写程序，建议您在Gene5软件的欢迎界面中选择 向导精灵来帮助您完成程序的编写。 双击欢迎界面的向导精灵 Next 第一步：检测步骤设置 双击对话框中Procedure下方 彩色图标看到编程界面（根据仪器的配置不 同，可以选择的功能按钮为黑色，不能选择的功能按钮变为灰色） Plate Type:在右侧的下拉框中选择酶标板的型号和类型 1 点击Synchronized mode：选择Well模式（逐孔读数：加一孔读一孔） 或者Plate模式（整板读数：加完整板后读数），该工具在使用分液装置时才需要使用。 2 ：读板，单击Read按钮，设置读板参数 Step label：对你所进行的读取步骤进行命名 Detection method：对你进行的检测类型进行选择 （吸光 发光 荧光） Read type：对选择的检测类型定义方法 （终点法 面积扫描法 光谱法） Sanning 功能，点击右侧则弹出下面的对话框，选择扫描的矩阵 选择该功能可以对每个孔进行多次读数，读数的次数通过设置矩阵的大小来控制，读数次数越多准确度越高，但是读板的速度会降低。 Spectrum 功能跳出如下对话框，设置扫描的起始波长、终止波长和波长间隔 Read speed：定义阅读的速度 （正常 扫描） Wavelenghs：对检测的波长进行定义，可以同时定义6个检测波长。 Full plate：选择要检测的孔（出现在不同步骤中，可以定义该步骤所对应的孔） Pathlength correction：光程校正（表示对样本孔的值进行光程校正，因为酶标板各样本孔内样本液的高度不一定为1cm，使用该选项，可自动把吸收值校正为光程1cm时的吸收值） 3 ：分液装置（根据实验需要进行设置），单击Dispenser按钮 Dispenser： 选择进样器（一般为两个），可以按照实验需要对进样器进行设置 Tip primer：选择是否需要将分液器的尖端充盈，防止空气的残留，并选择充盈 的液体体积 Dispense： 选择进样的体积和进样的速度 4 ：振荡，单击Shake按钮 Intensity：选择振荡的强度（低速、中速、高速、变速） Duration：选择振荡的时间 5 ：延时，单击Delay按钮 Delay time：选择在何步骤进行停顿以及停顿的时程。 6 ：定义动力学检测，单击kinetic按钮 Run time：运行时间 Interval:读数间隔 Reads：读数次数 Minimum interval:选择最小读数间隔时间 7 ：对一个孔或者一组孔设置一个标准，只有当指定的孔达到标准，才会开始进行整板阅读。 8 ：温度设定，单击Set temperature按钮 Incubator off 温度孵育关闭 Incubator on 温度孵育打开，并设定时间，（并可选择是否预热） 9 ：酶标板的进出控制，单击Plate out/in按钮，根据需要选择 酶标板弹出，显示对话框（comment中填写对话），酶标板弹入 酶标板弹出无对话框 酶标板弹入无对话框 10 ：读数结束选择，是否选择结束前弹出酶标板并添加提示语 11 ：对所编写的程序是否符合逻辑进行有效性的验证，如果不符合 显示错误的问题在第几步 注意：1以上11个步骤选择并不是每一个程序都要用到而是根据实验的具体需 要来进行任意的组合 举例：双荧光报告基因检测步骤设置 第二步：布板 在第一步检测步骤设置成功后，点击OK，精灵向导会提示，点击Next， 进入第二步，开始对酶标板进行拍布。 双击Plate Layout 下方彩色图标进入布板界面 Type：选择检测孔的类型，有Empty、Blank、Assay Control、Sample、Sample Control、Standard等可供选择。在下拉框中选择想要定义的孔的类型，然后在下方空白的模式96孔板中进行点