中间纤维intermediatefilament.doc

中间纤维intermediate filament 60年代中期，在哺乳动物细胞中发现10nm纤维，因其直径介于肌粗丝和细丝之间，故被命名为中间纤维(又称中间丝，intermediate filament，IF)(图9－19)。(一)成分 中间纤维的成分比微丝和微管复杂，按其组织来源及免疫原性可分为5类(表9－3)：(1)角蛋白纤维(keratin filament)，存在于上皮细胞中；(2)波形纤维(vimentin filament)，存在于间质细胞和中胚层来源的细胞中；(3)结蛋白纤维(desmin filament)，存在于肌细胞中；(4)神经元纤维(neurofilament)，存在于神经元中；(5)神经胶质纤维(neuroglial filament)，存在于神经胶质细胞。中间纤维的分布具有严格的组织特异性。这一点已被应用于肿瘤临床鉴别诊断，以鉴别肿瘤细胞的组织来源，显示了良好的应用前景。 中间纤维蛋白的氨基酸顺序已基本清楚，许多肽链序列已经测定。研究发现中间纤维蛋白来源于同一基因家族，具有高度同源性。中间纤维蛋白结构特征如图9－20所示，在中间纤维蛋白分子肽链中部有一段约310个氨基酸残基的α-螺旋区是高度保守的。两个相邻亚基对应的α-螺旋区形成双股超螺旋，即40～50nm的杆部(rod)，组装为中间纤维的主干(backbone)，这是5类中间纤维的共同结构特征。同一型的中间纤维蛋白其杆状区氨基酸顺序有70～90％的同源性，但不同型的中间纤维蛋白的同源性则低于30％。中间纤维蛋白杆状区由螺旋1和螺旋2构成，螺旋1和螺旋2的长度约为22nm，杆状区长度约在47nm左右。螺旋1和螺旋2又可分为A、B两个亚区，4个螺旋区间由3个短片段相连接，其中L12连接螺旋1和螺旋2，L1和L2分别连接1A与1B和2A与2B。 而中间纤维蛋白分子非螺旋化的头部(N端)和尾部(C端)的氨基酸顺序和肽链长度在各类不同中间纤维蛋白分子中有很大差异。对于每一特定类型的中间纤维蛋白，其头部和尾部又可进一步分为不同的亚区，(1)H亚区：同源区；(2)V亚区：可变区；(3)E亚区：末端区。根据中间纤维蛋白的氨基酸顺序的同源性，近年对中间纤维成分又提出新的分类：Ⅰ．酸性角蛋白；Ⅱ．中性和碱性角蛋白； Ⅲ．波形纤维蛋白，结蛋白，胶质纤维酸性蛋白；57kD神经中间纤维蛋白；Ⅳ．神经元纤维蛋白；Ⅴ．核纤层蛋白(核内中间纤维蛋白，见后文)；Ⅵ．nestin，一种在神经干细胞中发现的蛋白，根据其一级结构确定为中间纤维蛋白(图9-21)。 二)中间纤维蛋白基因 目前对中间纤维蛋白基因已有所了解，中间纤维蛋白基因含有内含子／外显子结构(图9－22)，同型中间纤维蛋白基因具有几乎一致的内含子／外显子结构，Ⅰ-Ⅲ型中间纤维蛋白基因在其顺序组织上相似，Ⅳ型(图9－23)中间纤维蛋白基因在其顺序组织上与Ⅰ-Ⅲ型中间纤维基因有较大差别。中间纤维蛋白基因定位和调节序列的性质尚不清楚。 中间纤维蛋白基因表达：蛋白表达方式已经清楚，中间纤维蛋白的表达具有严格的组织特异性。中间纤维基因蛋白表达的组织和发育调节可能是在转录和转录后水平，但其规律尚不清楚。 (三)装配 中间纤维蛋白组装为中间纤维的过程如图9－23所示，中间纤维蛋白的杆部组装为中间纤维的主干(backbone)。 首先，两个相邻亚基的对应α-螺旋区形成双股超螺旋，即二聚体。研究表明，二聚体中中间纤维蛋白平行排列，50nm长。Ⅰ-Ⅱ型中间纤维蛋白分子(角蛋白)组装为异二聚体(het-erodimer)，尽管在体外组装中同二聚体是可能的。一般由一种ⅠⅡ型角蛋白和一种与之相配对的Ⅱ型角蛋白组装成二聚体。Ⅲ-Ⅳ型中间纤维蛋白分子由相同的分子组装为二聚体，即同二聚体(isodimer)。 中间纤维组装的第二步是二聚体怎样组装为四聚体(tetramer)，早期曾提出中间纤维组装的三股螺旋模型，现已排除了这种可能。目前认为由两对超螺旋形成四聚体，四聚体可能是中间纤维解聚的最小亚单位。对四聚体中分子如何排列尚有争议，可能是平头(50nm)或半交叠(70nn)，很可能是反向平行排列(例如，中间纤维没有极性)，但也不排除顺向平行排列的可能。关于反向平行和半分子交叠发生在四聚体内还是四聚体间，尚有待进一步研究。 由四聚体或八聚体进一步组装为中间纤维的确切方式尚不清楚，组装好的中间纤维具有多态性，最多见的是由8个四聚体或4个8聚体组装为中间纤维，中间纤维横截面可由32个分子组成；也有一些中间纤维，在横截面上包含5～6个或11～12个四聚体。此外，中间纤维可能有原纤维(4聚体，protofilament)或原丝(8聚体，protofibril)等中间类型。 中间纤维蛋白杆部形成中间纤维的核心，直径为8～9nm。中间纤维蛋白的末端大多凸出于中间