生科131生科132真核基因表达调控作业.docVIP

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生科131生科132真核基因表达调控作业

生科1作业第八章真核基因表达调控1. 基因家族的分类及其主要表达调控模式 答:2. 何为外显子、内含子及其结构特点和可变调节? 答:3. 简述DNA 甲基化对基因表达的调控机制。 答:4. 真核生物转录元件的组成及其分类。 答:反式作用因子5. 简述增强子的作用机理 答:增强子是指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。可能有3中作用机制: 6. 简述反式作用因子的结构特点及其对基因表达的调控 答:反式作用因子(1) 特点 DNA结合域: 转录激活域:与其他转录因子相互作用的结构成分。 (2)反式作用因子能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。参与基因表达调控的因子, 它们与特异的靶基因的顺式元件结合起作用。编码反式作用因子的基因与被反式作用因子调控的靶序列(基因)不在同一染色体上。反式作用因子有两个重要的功能结构域:DNA结合结构域和转录活化结构域,它们是其发挥转录调控功能的必需结构,此外还包含有连接区。反式作用因子可被诱导合成, 其活性也受多种因素的调节。 7. 真核基因转调控中有几种方式能够置换核小体? 答:占先模式:可以解释转录时染色质结构的变化。该模型认为基因能否转录取决于特定位置上组蛋白和转录因子之间的不可逆竞争性结合。 动态模式该模型认为转录因子与组蛋白处于动态竞争之中,基因转录前染色质必须经历结构上的改变,即转换核小体中的全部或部分成分并重新组装,这个耗能的基因活化过程称为染色质重构。 8. 真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在如下差异 答:(1)单顺反子; (2)DNA与组蛋白结合; (3)存在大量重复序列,并且含有内含子; (4)根据生长需要DNA片段可以有序重排,或必要时可以增加某些基因的拷贝数; (5)转录调节区相对较大(远离启动子几百—几千bp)(6)转录与翻译位置不同; (7)需经剪接加工,才能顺利地翻译成蛋白质。 9. 简述真核生物转录水平调控过程 A. 简述占先模型和动态模型 B. DNA修饰(简述甲基化、乙酰化、磷酸化、异染色质化) (2) 转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA 形成的蛋白质-DNA 复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA 上形成转录起始复合物,才能形成有功能的启动子,才能被RNA 聚合酶所识别并结合。 () 反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA 识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。 () 转录起始的调控: A.反式作用因子的活性调节:a.表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;b.共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;c.配体结合——许多激素受体是反式作用因子;d.蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。 B.反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。 C.反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。 D.反式作用因子组合调控作用每种反式作用因子结合顺式作用元件后可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控是几种因子组合发挥特定作用。9. 简述RNAi的作用机制。 答:(1)第一步(起始阶段)是较长ds RNA在ATP参与下被RNase样的特异核酸酶切割加工成21~23nt的由正义和反义链组成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)。 (2)第二步(效应阶段)是siRNA 在ATP参与下被RNA解旋酶解旋成单链,并由其中反义链指导形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)。在ATP酶的作用下,活化的RISC以单链siRNA为向导识别同源性的单链靶mRNA,并在距离RISC的3’端11个碱基位置切割靶mRNA,导致靶基因的沉默。 (3) 第三步(RNAi的放大效应机制),siRNA不仅可引导RISC切割靶mRNA,而且可以以siRNA作为引物在RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP)作用下以靶mRNA为模板合成新的dsRNA ,它在Dicer酶的作用下也被裂解,生成大量的次级siRNA。形成一种链式反应,使特定的基因表达被阻止。 11. RNA干扰的应用有哪几方面? 答:(1)基因功能的研究;(2)基因治疗;(3)病毒类疾病的治疗。 12. siRNA的生物学意义。 答:(1)转录水平、转录后水平参与基因的表达调控; (2)维持基因组的稳定; (3)保护基因组免受外源核酸的侵入。 13. 简述miRNA与siRNA之间异同。 答:1. miRNA与siRNA之

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