联合抑制COX-2及5-LOX途径对胃癌细胞影响及机制的研究.pdfVIP

硕士研究生： 陈浩莉 导师：李建英副教授 中文摘要 目的：通过单独及联合应用环氧合酶一2抑制剂尼美舒利和5一脂氧合酶抑制剂／认861 可能的作用机制。 方法：AGS细胞常规培养，取对数生长期细胞做为实验组。以相差显微镜观察药物处 bluetetrazolium 理前后的细胞形态改变；用四氮唑蓝(thiazolyl bromide／MTT)法 检测细胞生长增殖情况；采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 表达水平；免疫印迹法(Western 水平。 结果：1、相差显微镜观察，药物处理组细胞与对照组相比，形态发生明显改变。2、 MTT法与TUNEL染色法表明，尼美舒利呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖，尼美舒 法(单药组VS两药组，po．01)和DNA琼脂糖凝胶电泳法显示，两药组与单药组比较，细 胞增殖抑制，凋亡增加。4、RT—PCR和western 没有交互作用(pO．05)。5、westernblot检测p-AKt蛋白表达的实验中，尼美舒利 互作用(p0．01) 导凋亡。而两药联合作用COX一2与5-LOX两条通路，能更有效地抑制AGS细胞增殖，诱 2 时，两药联合作用则促进5-LOX表达上调，并较单药组更大程度降低p-hKt蛋白表达。 关键词：环氧合酶-25一脂氧合酶磷酸化Akt联合抑制AGS细胞增殖凋亡 forthe COX-2 studies effectofdualinhibitionof and5_LOXon Experimental humanAGScellline andforits mechanisms possible Abstract testedthe oftheselectiveCOX-2inhibitor objeetive：Weefficacy inhibitorAA861ortheir combinationonhumanAGS carcinomacell gastric Line,then whetherthedualinhibitionofCOX-2and5-LOXhasamore anticanccr investigated power than either effect inhibitionof COX-2or5·LOXaloneonhumanAGScell single line,and its mechanisms． studied possible Methods：AGScellwete into aRPMI-1640medium喇t1110％fbtalbovine passaged G U／mL and100U／mL inallincubatorat serum(FBS)，100penicil