从男性尿液中提取尿激酶并进行活性测定实验报告.docVIP

“设计性实验”项目申请书 项目名称 从男性尿液中提取尿激酶并进行活性测定 项目负责人 申卓凡 年级、专业 2014级唐敖庆班化学方向 联系电话 电子邮件 shenzhuofan01@.com 填表日期 2016 年 月 日  填表说明 1、本申请书适用于各门实验课程的设计实验。 2、《设计性项目申请书》要按顺序逐项填写。填写内容要实事求是，讲究诚信，不能有雷同；表达要明确、严谨。空缺项要填“无”。 3、格式要求： （1）一律用A4纸打印，于左侧装订成册。 （2）字体：中文用宋体，英文和数字用Times?New?Roman字体标题编排应采用分级编号标题编排应采用分级编号国家标准《文后参考文献著录规则》(GB7714-87)项目名称 从男性尿液中提取尿激酶并进行活性测定 经 费 5000（元） 起止时间 2016年6月至2016年8月 负责人 学号 姓名 年级 专业 联系电话 E-mail 申卓凡 2014级 唐敖庆班化学方向shenzhuofan01@163.com 一、立项背景和依据 （一）研究目的 尿激酶（简称UK）是一种从人尿中提取的药物，在临床上被用于溶栓剂，预防和控制心肌梗死、高血压、动脉硬化等；具有抗肺癌转移作用，可用于治疗癌症；能降低精液黏稠度，促使精子和卵子结合受孕。UK通常从健康新鲜尿液中分离得到，该法因原料易得、价钱便宜而被广泛应用。由于UK有着重要的医疗价值，所以许多研究报导了各种从尿液中分离、提纯尿激酶的方法。但这些方法都面临着两个方面的问题：第一，提取和纯化的收率要高，尽可能保留酶的总活力；第二，精制后产品的比活要达到一定的高度。本项目研究的目的就是为了提高分离和提纯的效率。 （二）国内外研究现状分析 对于提取、纯化尿激酶的方法，国内外已有许多报导。目前，从已发表的文章和专利来看，从尿液中分离、提纯尿激酶主要有这些思路：发泡法：向尿液通气发泡，收集泡沫，滴加消泡剂使泡沫液化，使尿液得以浓缩，加入沉淀剂使尿激酶沉淀得到粗品；沉淀法：在尿液中加入沉淀剂，使尿激酶沉淀得粗品；吸附法：采用最多的方法。选择适当的吸附剂选择性吸附尿激酶，然后将其洗脱得尿激酶粗品。常用的吸附剂有硅胶、树脂等；离子交换法；超滤法。 （三）研究意义 因人尿中尿激酶的含量很低，取得尿激酶的关键在于如何从大量的尿液中富集尿激酶。从上世纪70年代至今，国内对尿激酶的提取工艺一直不尽人意。国内生产的尿激酶粗品仅有一部分制成精品，不少粗品直接出口由外商加工精制销售赚取利润。对尿激酶纯化技术进行研究，利国利民，具有显著的经济效益和社会效益。 （四）主要参考文献 [1]生物化学教研室尿激酶组. 尿激酶(人尿)的分离与精制——()尿激酶的分离[J]. 吉林大学自然科学学报, 1979(2). [2]刘兰英, 孙中武, 尹洪滨,等. 以732阳离子交换树脂为吸附剂分离尿激酶的研究[J]. 吉林大学自然科学学报, 1981(4). [3]赵新燕, 刘艳. 尿激酶的分离与纯化研究[J]. 现代制造, 2013(5):21-24. [4]祝一锋, 蔡志亮, 赵忠睦,等. 尿激酶精制新工艺[J]. 浙江工业大学学报, 1998(1): 63-66. [5]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 二部. 2015年版. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 532-533. [6]国家药典委员会. 中华人民共和国药典[M]. 四部. 2015年版. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 96-97. 二、项目研究内容 （一）项目主要研究内容 该项目主要设计了一套从新鲜男性尿液中提取、纯化尿激酶并进行酶活力测定的实验方案。 （二）拟解决的关键问题 1、提取和纯化的收率问题 人尿中尿激酶的含量很低，取得尿激酶的关键在于如何从大量的尿液中高收率地富集尿激酶。纯化尿激酶的各步骤中，如何在提高比活倍数的同时尽量保存尿激酶的总活力也是一个关键问题。 2、精制粗品时提高比活的问题 精制后产品的比活要达到一定的高度，药用尿激酶要求达到临床上“安全有效”的纯度。 （三）创新点 1、高效 本项目提供了与其他方案相比更加高效的一系列从尿液中分离、纯化尿激酶的实验方法。以732阳离子交换树脂作为尿激酶吸附剂，比其他传统方法提取收率高约10%。 2、低成本 本实验方案设计较为科学，在保证效果的前提下，通过不同试剂使用量及其效果的对比，能做到尽量节约。且没有用到不必要的昂贵设备。 3、较为简便 本实验流程设计尽量减少了繁琐无必要的操作步骤，以求快速高效。 三、项目实施方案（一）研究思路 由于报道的现有许多种分离、提纯方法各有优缺点，所以计划采取文献中记