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第七章血清浆蛋白质测定实验双缩脲法测定血清总蛋白原理血清浆中蛋白质的肽键在碱性溶液中能与价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似故称之为双缩脲反应这种紫红色络合物在处有明显吸收峰吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系经与同样处理的蛋白质标准液比较即可求得蛋白质含量试剂与器材可购商品试剂或自配溶液称取溶于新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却的去离子水约中冷却后定容至贮于有盖塑料瓶中若用非新开瓶的须先配成饱和溶液静置周左右使碳酸
第七章 血清(浆)蛋白质测定
实验34 双缩脲法测定血清总蛋白
【原理】 血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似,故称之为双缩脲反应。这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰,吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系,经与同样处理的蛋白质标准液比较,即可求得蛋白质含量。
【试剂与器材】 可购商品试剂或自配。
1.6 mol/L NaOH溶液 称取NaOH 240g,溶于新鲜制备的蒸馏水(或刚煮沸冷却
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