土壤质量指标.ppt

土壤微生物量 土壤（微）生物量 (Soil (Microbial) Biomass) 是广义土壤有机质中活的部分，不包括植物根和体积大于5 * 10-3 mm3 的土壤动物。主要是指土壤微生物的数量。 土壤微生物量通常占土壤有机质总量的1-3%。 土壤生物中微生物：60-80%；土壤动物：15-30%；植物根：5-10% 土壤微生物量的重要性 物质循环的动力土壤微生物量是所有有机物质进入土壤所必须穿过的针孔 养分转化的枢纽土壤生物量是植物有效N、P、S的储库和供应源 土壤质量的指标 土壤微生物量对土壤耕作管理措施及投入反应敏感 土壤性状对管理的敏感性 菌根测定 潜在可矿化有机N 微生物量C 土壤全C 持水量 pH 显示不同管理制度显著差异所需的时间 养分的源和库 农田土壤中生物量为200-1000 mg Bc. g-1 soil, 含N、P分别为100-600 和 50-300 kg P. ha-1, 超过施肥施入的养分量 土壤有机N的1-6%，有机S的1-3%在土壤微生物量；微生物量P占有机P的比例：耕作土壤中为2-5%；在牧场土壤中20% 相当于7-100 kg P ha-1 微生物组织中N 的周转速度是土壤有机质的5倍 土壤微生物量定量测定的方法 计数法 细胞中特异化学成分测定 熏蒸法 土壤生物活性测定 计数法步骤 菌落计数法 (Colony counting)、最大或然数法 (Most Probable Number or Extinction dilution Method)、稀释平板法 (Dilution plate counting) 将土壤样品制成一系列不同稀释度的稀释液，使样品中的微生物细胞充分分散，计数接种在培养基平板上长出的菌落形成单位 （CFU，Colony forming Units），乘以稀释倍数，得出数目；进行数目 - 体积 - 质量转化 微生物量测定方法 计数法 计数法特点 测定样品中的活菌数； 仅适用于细菌。真菌由孢子而不是由菌丝成长为新菌丝；不同属真菌产孢能力不同 估计值偏低，为微生物总量的1-10%。缺乏能使所有种类均能生长的培养基；且许多细菌处于不可培养状态 繁琐，工作量大，结果的准确性与操作者的经验有很大关系 估算半径、含水量、密度时较大误差 微生物量测定方法 计数法 直接显微镜镜检法 用酚苯胺蓝（Phenolic aniline blue）染色，在显微镜物镜视野中直接观察计数，测定出微生物细胞体积，然后将其转换为生物量 转换时需要细胞密度、含水量（或干物质含量）、干物质中C所占比例。微生物密度一般为1.1 g 鲜重 cm-3，干物质含量为0.28 g干重 g-1 鲜重，干物质含C量为0.47 g C g-1干重. 1.1*0.25 * 0.47 = 0.13 g cm-3 微生物量测定方法 计数法 直接镜检法特点 得数是平板计数法的10-100倍 可测量真菌菌丝的长度 酚苯胺蓝染色不能区分活的和死的微生物；可加入荧光物质加以区分； 用相差显微镜(Phase contrast microscopy)可区分空的菌丝和具细胞内容物的菌丝 微生物量测定方法 计数法 应用细胞中特异化学成分的前提 该物质仅存在于活的生物体中，在死亡微生物体或非生物的有机物质中量很小 在生物体中的浓度恒定：不随种类、生长条件和生理状态而变化 容易地从细胞和土壤中提取出来 有测定该物质灵敏、准确的方法 至今没找到一种物质能完全满足以上要求 微生物量测定方法测定细胞中特异化学成分 特异化学成分的种类 胞壁酸 (Muramic Acid) 是细菌细胞壁的唯一组成成分，但大量存在于土壤中 几丁质 (也称甲壳素Chitin) ，是多数真菌细胞壁的组成成分 其组成单体N-乙酰葡萄糖胺可用比色法精确测定 不足之处是它也大量存在于节肢动物的外骨骼中 微生物量测定方法测定细胞中特异化学成分 麦角甾醇 麦角甾醇 (Ergosterol) 用于评估分解中的植物残体上真菌的量； 尽管在微型藻类中有少量存在，但在维管植物中极为罕见。 不同属真菌体内含量差异很大，且随真菌年龄变化较大。可以用来定量测定真菌群落结构的变化 微生物量测定方法测定细胞中特异化学成分 膜磷脂脂肪酸 磷脂脂肪酸（PLLA)仅存在细菌和真菌细胞膜中 特定微生物组具有特异性磷脂脂肪酸 磷脂脂肪酸可通过从中土壤提取出来，并用气相色谱测定其总量 磷脂脂肪酸可反映出微生物群体的多样性，以及微生物量中真菌和细菌比例 微生物量测定方法测定细胞中特异化学成分 ATP ATP存在于所有活的生物细胞中；死亡生物体细胞内的及土壤中游离的ATP很快分解； 用荧光素—荧光素酶系统(luciferin-luciferase system)可精确