第二十至二十三教学单元第8章微生物遗传学di2.pptVIP

微生物遗传学的几个基本概念 核酸是遗传物质基础的三个经典实验原理 质粒、质粒分离及质粒分类举例 基因及其突变的基本定义 基因突变的特点(规律) 自发性\不对应性\独立性\稀有性\可诱变性\稳定性\可逆性 证明基因突变自发性和不对应性的实验证据 营养缺陷型 抗性突变型 条件致死突变型 形态突变型 抗原突变型 产量突变型 第四节 基因突变的机制 除了DNA聚合酶进行校正外，还通过几种不同的机制进行DNA的修复： (1) 光复活作用 (2) 切除修复 (3) 重组修复 (4) SOS修复 三、DNA损伤的修复 * * 下面介绍几种常用的突变型及其分离 1. 按照突变的表型分类： 选择性突变株 （能在选择性培养基上或其它的 选择性条件下迅速选出或鉴别出） 非选择性突变株 四、基因突变的类型 （1）营养缺陷型（auxotroph） 一种缺乏合成其生存所必须的营养物（包括氨基酸、维生素 、碱基等）的突变型，只有从周围环境或培养基中获得这些 营养或其前体物（precursor）才能生长。 营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和 育种的重要手段 表型判断的标准： 在基本培养基上能否生长 特点： 在选择培养基（一般为基本培养基）上不生长 负选择标记 突变株不能通过选择平板直接获得 营养缺陷型的表示方法： 基因型： 所需营养物的前三个英文小写斜体字母表示：hisC （组氨酸缺陷型，其中的大写字母C同一表型中不同基因的突变） 表型： 同上，但第一个字母大写，且不用斜体：HisC 在具体使用时多用hisC-和hisC+，分别表示缺陷型和野生型。 （2）抗药性突变型（resistant mutant） 基因突变使菌株对某种或某几种药物，特别是抗生素，产生抗性。 特点： 正选择标记 （突变株可直接从抗性平板上获得-----在加有相应抗生素的 平板上，只有抗性突变能生长。所以很容易分离得到。） 表示方法： 所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示 strr 和 strs 分别表示对链霉素的抗性和敏感性 （3）条件致死突变型（conditional lethal mutant） 在某一条件下具有致死效应，而在另一条件下没有致死 效应的突变型。 常用的条件致死突变是温度敏感突变，用ts（temperaturesensitive） 表示，这类突变在高温下（如42℃）是致死的，但可以在低温（如 25-30℃）下得到这种突变。 特点： 负选择标记 这类突变型常被用来分离生长繁殖必需的突变基因 （4）形态突变型（morphological mutant） 造成形态改变的突变型 特点： 非选择性突变 突变株和野生型菌株均可生长，但可从形态特征上进行区分。 举例： 产蛋白酶缺陷突变株的筛选 菌落颜色变化 β半乳糖苷酶基因的插入失活，使重组子菌落为白色而 与兰色的非重组子分开。 （5）抗原突变型 指由于基因突变引起的细胞抗原结构发生的变异类型，包括细胞壁缺陷变异、荚膜或鞭毛成分变异等。 （6）产量突变型 通过基因突变而引起的目标代谢产物的产量发生变化的变异菌株，其在产量上高于或低于原始出发菌株。如果产量提高的突变株，被称为“正突变”（plus-mutant），也称为“高产突变株”(high producing mutant)；如果产量低于出发菌株的突变株，则称为“负突变”（minus-mutant）。 2. 按照突变所引起的遗传信息的改变情况可分为三种： 同义突变 表型不发生改变（密码子是简并的,如CGU变成CGC，但都编码精氨酸）； 错义突变 改变的密码子编码的氨基酸改变了； 无意义突变 终止密码子（UAA, UAG, UGA） 其它突变类型 毒力、生产某种代谢产物的发酵能力的变化等在实际应用 中具有重要意义突变类型, 一般都不具有很明显或可直接检测 到的表型。其突变株的获得往往需要较大的工作量。 一、基因突变的分子基础 (一)自发突变 (二)诱发突变 引起自发突变的原因主要有以下几方面： 背景辐射和环境因素引起； 有害代谢产物引起； 互变异构效应引起的碱基配对错误； DNA复制过程中碱基配对错误 ； 转座因子的作用。 通过人为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高自发突变频率的手段 。 生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变（10-6-10-10 ）。它是生物进化的根源。 (二) 诱发突变 诱变剂（mutagen）： 凡能提高基因突变频率的因素统称为诱变剂 诱变剂的种类 物理诱变剂 化学诱变剂 生物诱变剂 碱基类似物诱变剂； 与碱基起化学反应的诱