十、体外哺乳动物细胞基因突变试验摘要.docVIP

十、体外哺乳动物细胞基因突变试验 In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test 1 范围 本规范规定了体外哺乳类细胞基因突变试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于检测化妆品原料及其产品的致突变性。 2 规范性引用文件 OECD Guidelines for Testing of Chemicals (No. 476, 1997) 3 试验目的 该测试系统用于检测化妆品原料及其产品引起的突变，包括碱基对突变、移码突变和缺失等，从而评价受试物引起突变的可能性。 4 定义 正向突变（Forward mutation）：从原型至突变子型的基因突变，这种突变可引起酶和功能蛋白的改变。 突变频率（Mutant frequency）：所观察到的突变细胞数与存活细胞数之比值。 试验原理 在加入和不加入代谢活化系统的条件下，使细胞暴露于受试物一定时间，然后将细胞再传代培养，突变细胞在含有6-硫代鸟嘌呤（6-thioguanine，6-TG）或三氟胸苷（trifluorothymidine，TFT）的选择性培养液中能继续分裂并形成集落。基于突变集落数，计算突变频率以评价受试物的致突变性。 6 试验方法 6.1 试剂和受试物制备 6.1.1 受试物 6.1.1.1 受试物的配制：固体受试物需溶解或悬浮于