一株耐盐细菌的16SrRNA基因序列分析-生物技术通报.PDF

生物技术通报 年第 期 ·研究报告· BIOTECHNOLOG Y BULLETIN 2008 6 一株耐盐细菌的16S rRNA 基因序列分析 汪长东 陈鹏 闫旭 景红娟 黄阜峰 汪越胜 杨广笑 何光源 （华中科技大学生科院中英联合实验室 教育部分子生物物理重点实验室，武汉 430074） 摘 要： 从舟山群岛滩涂土壤中获得了海水和底泥样品，并从中提取到了一株耐盐细菌，通过用不同盐浓度的培 养基培养，挑取单菌落，反复划线纯化，得到了耐盐菌的单菌落。通过菌株基因组DNA的提取、菌株的抗性实验、质粒的 提取、16S rRNA的PCR扩增及克隆、16S rRNA的全序列分析等手段，对该菌株的16S rRNA的基因序列进行了研究。 关键词： 耐盐菌 筛选 16S rRNA PCR The 16S rRNA Gene Sequence Analysis of a Halotolerant Bacteria Strain （China-UK HUST-RRes Genetic Engineering and Genomics Joint Laboratory ，Huazhong University of Science and Technology ，Wuhan 430074） Abstract Key words ：Halotolerant bacteria Screening 16S rRNA PCR 在盐田生态系统中生活的细胞，极高的含盐量可以引起高渗透压，为了生存，细胞就要保持低水压同 [2] 时增加细胞中钠离子的浓度。耐盐微生物进化出与众不同的策略以对重平衡渗透压 。海洋环境的生物，其 机体组分和代谢产物也与陆生生物大不相同，其细胞内形成了多种具有特殊功能的酶，同时蕴含着大量的 [3] 新型化合物，对人类的生产和生活都是十分有用的 。 根据其对盐分的要求以及耐受范围不同， 将盐生微生物分为 类：即非嗜盐菌（最适生长盐度 Kushner 6 即氯化钠浓度0．2mol/L ）主要是淡水微生物；轻度嗜盐菌（最适生长盐度为 0 ．2 ～0 ．5mol/L ），多数海洋微生 物属于这个类群；中等嗜盐菌（最适生长盐度为 0 ．5～2 ．5mol/L ）；边缘极端嗜盐菌（最适生长盐浓度在 1．5 ～ 4 ．0mol/L ）极端嗜盐菌（最适生长盐度 2 ．5～5．2mol/L ）；耐盐菌（生长对氯化钠没有要求，其中对盐分的耐受 浓度超过 2 ．5mol/L 的称为极端耐盐菌）[4 ，5] 。 [6] 近年来，从我国青海省大柴旦盐湖、新疆艾丁湖、塘沽盐场、青岛东风盐场等地不断分离出耐盐菌新种 。 舟山位于我国东南沿海，中国大陆海岸线的中心，地理坐标为东经 121°30 ′~123°25 ′ ，北纬29°32 ′~-31°04 ′ ， 是著名的长江、钱塘江和甬江的出海口，海洋资源相当丰富，是进行