微球测速聚类分析流式液路稳定性评估.pdfVIP

第 24卷 第 1期 光学 精密工程 Vo1．24 No．1 2016年 i月 OpticsandPrecisionEngineering Jan．2016 文章编号 1004—924X(2016)01—0030～09 微球测速聚类分析的流式液路稳定性评估 张文昌 ，祝连庆 ，娄小平 ，刘 超 ，孟晓辰 (1．合肥工业大学仪器科学与光电工程学院，安徽合肥230009； 2．北京信息科技大学光电测试技术北京市重 实验室，北京 100101) 摘要：提出了一种基于 90。Mie散射的高速图像采集微球测速方法，用于准确评估流式细胞仪流动室内的层流状态及单 细胞流的稳定性。利用流动室内微球速度的稳定性对流动室内单细胞流的稳定性进行了评估。首先，利用高速显微成 像系统采集 90。Mie散射光的图像，选取 9O。侧 向散射光以避免激发光源直射光的干扰 ，同时去除背景光源并提高图像 对比度；然后，利用基于梯形白化权函数的灰色聚类分析方法对微球拖尾图像进行分类，实现对不足、正常、衍射和重叠 4种情况的准确分类；最后 ，利用中点法确定正常图像上升沿及下降沿的边界，提高拖尾长度计算的准确性。搭建了高 速微球测速实验系统 ，对本文方法进行验证。结果表明，该方法能够获得清晰的微球拖尾图像并对微球拖尾图像进行准 确分类。对本文实验系统测得的微球拖尾长度平均值为 116．9个像素点，标准差为 1．7。 关 键 词 ：流式细胞仪 ；液路稳定性评估 ；微球测速 ；高速 图像采集；聚类分析 中图分类号 ：TH773 文献标识码 ：A doi：10．3788／OPE0030 Stabilityevaluation offlow cytometerliquidpathbased onclusteranalysisofparticlevelocity ZHANG W en—chang ，，ZHU Lian—qing’ ，LOU Xiao—ping ，LIU Chao ，MENG Xiao—chen (1．SchoolofInstrumentationScience Opto—electronicsEngineering， HefeiUniversityofTechnology，Hefei230009，China； 2．BeijingKeyLaboratoryfor0p08ZPcr0 csMeasurementTechnology， BeijingInformationScienceandTechnologyUniversity，Beijing100101，China) *C0r 夕0 gauthor，E-mail：zhulianqing@{sina．coTn Abstract：A high—speed particle imagevelocimetry based on 90。Mie scattering wasproposed to evalHatethestatusof1aminarflow andsingle—cellflow stabilityintheflow cellofaflow cytometer． Thevelocitystabilityoftheparticlesintheflow cellwasusedtoevaluatethesingle—cellflow stability oftheflow cytometer．Firstly，90。M iescattering imagesoftheparticlewereacquiredwithahigh— speedimagesampling system．The90。Miescattering selected could avoidtheinterferenceofthe excitation lightsourceand couldremovethebackground sourceand improvethe imagecontrast． Then，thegreyclus