两株抗乙酰羟酸合酶类除草剂克雷伯氏菌的分离及其AHAS基因ilvIH的.PDF

2008 14 5 ): 663~667 2008-10-25 应用与环境生物学报 ， ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2008.00663 两株抗乙酰羟酸合酶类除草剂克雷伯氏菌的分离 * 及其AHAS基因ilvIH的克隆 ** 沈晶晶 黄 星 俞欣妍 李顺鹏 何 健 (南京农业大学生命科学学院微生物学系/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室 南京 210095) 摘 要 乙酰羟酸合酶 (AHAS)是磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑嘧啶类、磺酰胺类和嘧啶水杨酸类等乙酰羟酸合酶抑制 剂类除草剂的作用靶标，获得能抗此类除草剂的AHAS突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值. 本文从长期使 用磺酰脲类除草剂的农田土壤中分离到2株抗性细菌HR9和HR11，根据其表型特征、生理生化特性和16SrDNA序列系 统发育分析，初步鉴定为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.). 菌株HR9和HR11对甲磺隆的最高耐受浓度分别达到9 600 μmol/L 和8 200 μmol/L，且对各种乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂具有交叉抗性. 利用PCR技术从 HR9、HR11和实验室保存的 一株除草剂敏感型克雷伯氏菌LB-2的总DNA中克隆到编码AHAS的基因ilvIH ，其中ilvI编码大亚基即催化亚基，ilvH编 码小亚基即调节亚基 . 比对结果表明，菌株HR11与菌株HR9的ilvI有6个位点的氨基酸存在差异，HR9、HR11与LB-2的 ilvI各有20和16个位点的氨基酸存在差异. 图4 表 1 参20 关键词 乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂；除草剂抗性细菌；乙酰羟酸合酶； ilvIH CLC Q936 Isolation of Two Bacterial Strains Resistant to Acetohydroxyacid Synthase (AHAS) * Inhibitor Herbicides and Cloning of AHAS Genes ilvIH SHEN Jingjing, HUANG Xing, YU Xinyan, LI Shunpeng HE Jian** (Key Laboratory of Microbiological Engineering of Agricultural Environment, Ministry of Agriculture, Microbiology Department, College of Life Science, Nanjing Agricultural University , Nanjing 210095, China) Abstract Acetohydroxyacid synthase (AHAS) is a target for sulfonylurea, imidazolinone, triazolopyrimidine and other AHAS inhibitor herbicides.