长循环靶向载丝裂霉素壳聚糖纳米粒的制备和药效学的分析研究.pdfVIP

摘要 目前，恶性肿瘤已经成为严重危害人类健康的重大疾病，而化疗药物普遍存 在抗肿瘤选择性差和毒副作用大的缺点，导致治疗效果不理想，给患者带来极大 的痛苦。因此，如何提高肿瘤患者的生活质量，如何提高抗肿瘤药物的靶向性及 其治疗效果成为肿瘤治疗的首要命题。叶酸(FA)与其受体的结合具有一定的 特异性和选择性。近年来，利用叶酸受体在某些肿瘤部位的表达远高于其在正常 组织的表达的特性，形成了一种叶酸修饰的靶向给药系统，这种抗肿瘤传递机制 倍受广大科研工作者的亲睐。纳米给药系统由于其可以控制释放药物而引起广泛 关注，其中具有良好生物相容性、生物可降解性的壳聚糖是常用的载体材料。另 外，聚乙二醇(PEG)是一种亲水性高分子，用于修饰给药系统后能增加体内循 环时间。本研究目的在于开发一种稳定、粒径可控的纳米粒，并对其进行叶酸和 PEG功能化修饰，载药后使其成为一种安全、长循环、可主动靶向肿瘤组织的 抗肿瘤给药系统。 论文的研究内容：(1)采用双交联法即离子交联法结合化学交联法制备粒径 可控、稳定性较好的壳聚糖纳米粒子，考察多聚磷酸钠与壳聚糖的质量比、反应 时间和pH值对纳米粒子粒径的影响；研究戊二醛投入量对纳米粒子形态和表面 氨基数量的影响。(2)通过活化叶酸(FA)改性PEG修饰纳米粒子，使其具有 主动靶向和长循环的特性，通过红外光谱法进行结构验证；最后接枝丝裂霉素 (MMC)，并考察其体外释药特性。(3)通过细胞毒性试验(MTT)，激光共聚 焦荧光显微镜观测和对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率试验，验证FA．PEG修饰的壳聚糖 纳米粒子的靶向性、长循环性以及对肿瘤的抑制作用。(4)通过药代动力学实验， 研究FA．PEG修饰的壳聚糖载药纳米粒子在大鼠体内的动态代谢特征。 论文研究结果：(1)利用双交联法成功制备出粒径可控在200～500nm，性能 稳定的壳聚糖纳米粒子。(2)经FA和PEG共同修饰，并载有丝裂霉素的壳聚糖 纳米粒子，其载药量为9．73％、包封率为21．58％，体外释药行为呈现速释和缓 释的双相特征。(3)MTT结果显示FA．PEG修饰的壳聚糖载药纳米粒子具有较 高的细胞毒性，并随着时间的延长，细胞毒性逐渐增加。激光共聚焦试验结果也 表明：FA修饰能增加粒子被HeLa细胞摄取的能力。而体内抑瘤率试验结果显 示：载药纳米粒子与原料药的抑瘤率相似，达到31．4％，但是FA．PEG修饰的载 药纳米粒子能显著降低药物的全身毒副作用。(4)药代动力学试验结果显示： FA．PEG修饰的壳聚糖载药纳米粒子的药一时曲线下面积(AUC)、表观分布容积 注射剂。说明MMC制备成纳米粒后，具有一定的缓释效果和长循环作用。 关键词：壳聚糖纳米粒；主动靶向；长循环 Ⅱ Abstract the which hasbecomeoneof mostseriousdiseasesendanger Presently，cancer to human isoften ineffectibletreatmentdue health．Chemotherapyimpotent effects to unfavorabletowardstumorsand side and specificity great bringsgreatpain the a the forresearchersistoamelioratethe resulLall—importantchallenge patients．As anti-cancer of