健康人外周血白菌果糖二磷酸醛缩酶的抗原特异性T细.PDFVIP

医学研究生学报 ２０１７年６月 第３０卷 第６期　 Ｊ Ｍｅｄ Ｐｏｓｔｇｒａ，Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．６，Ｊｕｎｅ，２０１７ ·５６５ · 论　 　 著 （基础研究） 健康人外周血白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶的抗原 特异性Ｔ细胞检测 胡毓安，王静瑜，商秀娟，李　 伟，周　 妍，陆静芬，李芳秋，史利宁 　 　 ［摘要］　 目的　 侵袭性念珠菌病临床致死率较高，文中旨在研究白念珠菌免疫优势抗原 １，６⁃果糖二磷酸醛缩酶（Ｆｂａ）的 细胞免疫应答类型，以评估其在侵袭性念珠菌病中是否具有保护性细胞免疫功能。 　 方法　 建立检测健康人外周血单个核 细胞（ＰＢＭＣ） 中白念珠菌Ｆｂａ 抗原特异性Ｔ 淋巴细胞分泌干扰素γ（ＩＦＮ⁃γ） 、白细胞介素⁃４（ＩＬ⁃４）与白细胞介素⁃１７Ａ（ＩＬ⁃ １７Ａ）的酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ）。 用白念珠菌重组抗原Ｆｂａ为刺激物，检测２６名健康人外周血ＰＢＭＣ 中分泌ＩＦＮ⁃γ、ＩＬ⁃４ 和ＩＬ⁃１７Ａ 的阳性斑点形成细胞（ＳＦＣ）频数。 　 结果　 Ｆｂａ刺激后，２６名健康人分泌ＩＦＮ⁃γ、ＩＬ⁃４和ＩＬ⁃１７Ａ 的频数分别为２３．００ （９．７５，４２．５０）个、０（０，０．２５）个和１．５（０．７５，８．２５）个，三者间两两比较差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。 ＩＦＮ⁃γ、ＩＬ⁃４和ＩＬ⁃１７Ａ 的 应答率分别为１００％（２６／ ２６）、１５．３８％（４／ ２６）和７６．９２％ （２０／ ２６），ＩＦＮ⁃γ 和ＩＬ⁃１７Ａ 的应答率显著高于ＩＬ⁃４应答率（Ｐ＜０．０１）。 其中Ｆｂａ刺激后产生强ＩＦＮ⁃γ应答（ＳＦＣ≥２０）者占５７．６９％（１５／ ２６），而产生ＩＬ⁃１７Ａ强应答者 １人，无人产生强ＩＬ⁃４应答。 健 康受试者ＰＢＭＣ应答同时产生Ｔｈ１和Ｔｈ１７型应答者占６５．３８％（１７／ ２６）；其中１９．２３％（５／ ２６）的受试对象仅产生Ｔｈ１型细胞免 疫应答，无受试对象单独产生Ｔｈ２型细胞免疫应答。 　 结论　 白念珠菌特异性抗原Ｆｂａ诱导的Ｔ 细胞免疫以Ｔｈ１型和Ｔｈ１７ 型为主，提示该抗原将产生保护性细胞免疫应答，具有成为理想疫苗的潜能。 　 　 ［关键词］　 果糖二磷酸醛缩酶；酶联免疫斑点法；干扰素γ；白细胞介素⁃４；白细胞介素⁃１７；白念珠菌 　 　 ［中图分类号］　 Ｒ３９２　 　 　 ［文献标志码］　 Ａ　 　 　 ［文章编号］　 １００８⁃８１９９（２０１７）０６⁃０５６５⁃０４ 　 　 ［ＤＯＩ］　 １０．１６５７１／ ｊ．ｃｎｋｉ．１００８⁃８１９９．２０１７．０６．００２ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｌｄｏｌａｓｅ ａｎｔｉｇｅｎ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｂｙ ＥＬＩＳＰＯＴ ａｓｓａｙ ＨＵ Ｙｕ⁃ａｎ，ＷＡＮＧＪｉｎｇ⁃ｙｕ，ＳＨＡＮＧ Ｘｉｕ⁃ｊｕａｎ，ＬＩ Ｗｅｉ，ＺＨＯＵ Ｙａｎ，ＬＵＪｉｎｇ⁃ｆｅｎ，ＬＩ Ｆａｎｇ⁃ｑｉｕ，ＳＨＩ Ｌｉ⁃ｎｉｎｇ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｒｅｇｉｏｎ，ＰＬＡ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ） 　 　 ［Ａｂｓｔｒａｃｔ ］　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｉｎｖａｓｉｖｅ ｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ．Ｔｈｅｐｕｒｐｏｓｅｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙｗａｓ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅＴ ｃｅｌｌｓｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｆｒｕｃｔｏｓｅｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅａｌｄｏｌａｓｅ （Ｆｂａ），ａｎｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔａｎｔｉｇｅｎｏｆ Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ，ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅａｎｔｉｇｅｎｈａｓｔｈｅｐｏｓｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐｒｉｍｉｎｇｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅｐｒｏｔ