CIAP12在膀胱移行细胞癌中表达和其临床意义的研究.pdf

clAPI／2在膀胱移行细胞癌中表达及其临床意义的研究 博士生姓名：车翔宇 指导教师：宋希双教授 专业名称：泌尿外科学 摘要 of 的凋亡抑制蛋白(Inhibitor Apoptosis 究中我们发现细胞核中elAPl(cL心l-N)的表达与膀胱癌的分期明显正性相关， 此项结果国际国内均未见报道；为进一步证实clAPl／2在膀胱移行细胞癌中的表达 情况及其临床意义，我们设计并进行下列研究。 目的： (1)检测不同分期膀胱移行细胞癌患者临床标本中clAPl与elAP2的表达并行 多因素统计分析。(2)检测cL妤2基因在膀胱癌细胞系中的表达情况，观察clAP2 基因对膀胱癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。(3)检测cIAPl基因对膀胱癌细 胞增殖、凋亡以及化疗敏感性的调节作用，并检测其对膀胱癌细胞周期的影响。 方法： (1)选取膀胱移行细胞癌组织标本102例作为实验组，选取同期行耻骨上经 膀胱前列腺切除术的良性前列腺增生患者的正常膀胱粘膜组织32例作为对照组。 胱癌临床病理学特征之间的关系； (2)RT．PCR检测c脚2在膀胱癌细胞系T24、 Western EJ、5637及BIU．87中的表达情况；blot进--步检测cIAP2蛋白在上述四种 细胞系中的表达情况； MTT、TUNEL实验检测c工AP2缺失或过表达对膀胱癌细胞 增殖、凋亡的影响，并检测cL心2对药物丝裂霉素化疗敏感性的影响。(3)应用 相同的方法检测c御1在膀胱癌细胞系T24、EJ、5637及BIU．87中的表达情况；同 时检测cL垤1缺失或过表达对膀胱癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响，并应用 流式细胞检测下调clAPl的表达对膀胱癌细胞T24细胞周期的影响。 结果： 1．统计学分析表明：相对于正常膀胱上皮组织，elAPl与clAP2的表达在膀胱 癌中显著增加；elAPl(cIAP]-N)的细胞核染色与肿瘤的分期和分级密切相关； cL心l_N的表达与Ⅺ67的表达密切相关。 有所表达，Western blot的结果进一步证实了clAP2在蛋白水平的表达；应用脂质 体转染使T24细胞中clAP2过表达之后，MTT结果显示T24细胞的增殖能力增强， 够显著提高I24细胞对化疗药物丝裂霉素的凋亡敏感性； 3．RT-PCR、Western blot结果显示，在四种膀胱癌细胞系T24、EJ、5637及 结果显示I24细胞的增殖能力增强，TUNEL结果显示T24细胞的自发性凋亡减少； 胞的增殖能力下降，TUNEL结果显示T24细胞的自发性凋亡轻度增加并且I24细 胞对化疗药物丝裂霉素的凋亡敏感性增强；流式细胞结果显示下调elAPl的表达 之后可使Go／GI期细胞增加，而S期细胞减少俾o．05)。 结论： 1．细胞核中clAP．1的表达与膀胱移行细胞癌的分期、分级密切相关。 2．下调cIAP2在T24细胞中的表达可以有效的抑制膀胱癌的生长，提高T24 细胞对化疗药物丝裂霉素的凋亡敏感性。 3．下调elAPl在他4细胞中的表达可以抑制膀胱癌的生长，并且对T24细胞 的细胞周期产生影响。 关键词：elAPlelAP2膀胱癌增殖与凋亡细胞周期 2 The of andclinical of studyexpression significance in transitionalcellcarcinoma cIAPl／2bladder Doctor candidate：CheXi degree angyu X