金鱼胚胎发育过程中磷酸酶活性的变化-河南师范大学.pdfVIP

第30卷第7期 水 产 科学 VbI．30No．7 2011年7月 FISHERIESSCIENCE Jul．2011 金鱼胚胎发育过程中磷酸酶活性的变化 王书平，孔祥会，江红霞，聂国兴，李学军 (河南师范大学生命科学学院，河南新乡 453007) 摘 要：以金鱼胚胎为研究对象，在金鱼受精后24h，每间隔24h取健康鱼卵，测定胚胎不同发育时期 酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性。结果显示，胚胎受精24h时酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性较低，伴随 着胚胎发育，酶活性均呈现增强的趋势，在144h达到最高。金鱼胚胎发育中酸性磷酸酶和碱性磷酸 酶的活性随发育时间呈现上升趋势，以此满足胚胎发育中细胞增殖、信号传导和物质代谢等对磷酸酶 不断增长的需求。 关键词：酸性磷酸酶；碱性磷酸酶；胚胎发育；金鱼 中图分类号：S965．8 文献标识码：A 文章编号：1003—1111(2011)07—0405-04 酸性磷酸酶和碱性磷酸酶广泛存在于各种动 就金鱼(已rnssf牡s口“地￡“s)胚胎发育过程中酸性磷 物体内，是非特异性的磷酸单酯水解酶。它们分别 酸酶和碱性磷酸酶活性的变化进行研究，以期进一 在酸性和碱性条件下起催化作用，直接参与磷酸基 步理解金鱼胚胎发育过程中生理生化的动态变化， 团的转移与代谢。酸性磷酸酶和碱性磷酸酶是动 为指导金鱼的人工繁殖提供理论依据。 物体内的重要解毒酶系，在细胞调节和营养物质的 1材料与方法 消化、吸收及转运过程中都起着重要作用C1]。作为 1．1受精卵采集 物质代谢过程中的重要调控酶，酸性磷酸酶和碱性 人工授精后，获取金鱼受精卵，随机分组，每组 磷酸酶对鱼类的生长和发育极为重要。 约600粒，置于含500ml试验用水的培养皿(直径 酸性磷酸酶主要定位于溶酶体和内膜系统c2]， 20cm，高3cm)中。每组设3个平行。试验用水为 是溶酶体的标志酶。在酸性环境中，通过酸性磷酸 充分曝气的自来水，每24h换水约3／5。试验期间 酶的水解作用，破坏表面带有磷酸酯的外源异物， 水温控制在(18士1)℃。鱼卵受精24h后开始取 预防感染D]，发挥着免疫的功能。碱性磷酸酶则是 样(此时用肉眼较易区分出受精卵和未受精卵)。 一类膜结合糖蛋白[41，在调节跨膜运输[33及生物体 随后分别于48、72、96、120、144h取样。胚胎发育 内DNA、RNA、蛋白质和脂类等物质代谢中起着重 过程中，及时清除未受精卵和异常胚胎。 要作用。 1．2样品制备 鱼类胚胎发育是鱼类生命过程的关键时期，在 每组分别取受精卵100粒，用滤纸吸干，置于 如此短的时间内却要实现形态、代谢和生理上的巨 离心管中，贮存于冰箱一80℃保存备用。制样时， 大变化，酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的活性亦应伴随 受精卵整体匀浆，按质量体积比1：4(g／m1)加入 胚