IL-12基因修饰人脐带间充质干细胞抗卵巢癌SKOV3细胞作用的体外探究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………．1 英文摘要……………………………………………………………．．4 英文缩写………………………………………………………………．．7 研究论文IL．12基因修饰人脐带间充质干细胞抗卵巢癌 SKOV3细胞作用的体外研究 前言…………………………………………………………………99刖吾………………………………………………………………… 材料与方法…………………………………………………………10 结果………………………………………………………………．：．17 附图………………………………………………………………．．20 附表…………………………………………………………………26 讨论………………………………………………………………．．27 结论…………………………………………………………………32 2 参考文献……………………………………_…………………．．3 综述 脐带间充质干细胞研究进展…………………………………36 致谢……………………………………………………………………．．48 个人简历…………………………………_…………………………．．49 中文摘要 的体外研究 摘 要 目的：本实验拟采用体外培养卵巢癌细胞系SKOV3(卵巢浆液性囊 期及细胞凋亡的影响，探讨UC．MSCs作为基因治疗的靶向运载工具对卵 巢癌的疗效以及其机制，以期为卵巢癌的基因治疗提供新的靶向。 方法： 1体外培养卵巢癌细胞系SKOV3(卵巢浆液性囊腺癌细胞株)、人脐 显微镜观察细胞形态变化及增殖情况。 2将重组腺病毒反复扩增至所需量，应用腺病毒介导IL．12基因转染 UC．MSCs细胞组(Ad．MSCs组)和UC．MSCs组。 3利用Western UC．MSCs组中IL．12蛋白的表达。 Ad．MSCs组和UC．MSCs组中IL．12mRNA的表达。 作为转染组，将卵巢癌SKOV3细胞接种于培养24h后的UC．MSCs上清 液作为对照组。 6倒置显微镜对比观察转染组及对照组卵巢癌SKOV3细胞第 态的影响。 响。 中文摘要 期和细胞凋亡的影响。 9采用SPSS13．0统计软件，t检验检测组间差异的显著性，数据以“均 数士标准差”(x士s)表示，P0．05为差异有显著性的标准。 结果： 1 Western IL．12基因在蛋白水平获成功表达。 2 IL．12 mRNA的表达。 不同时段，转染组SKOV3细胞生长均受到抑制，细胞贴壁率下降，细胞 密度降低，细胞突起减少：对照组SKOV3细胞形态不同时段均未见明显 变化。 4 h 下：随着时间延长，转染组对SKOV3细胞抑制增殖能力显著提高，72 后抑制率达(47．56-a：2．3 1)％，具有统计学意义(PO．05)。 转染组与对照组相比，SKOV3细胞处于增殖期S+G2期的细胞比例下降， 细胞增殖。 (2．69i-0．45)％相比，凋亡率显著增高，具有统计学意义(PO．05)。 结论：本实验以UC．MSCs作为基因治疗的靶向运载工具，成功构建 其分泌的外源性IL．12能够显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其 凋亡。该细胞系可应用于基因治疗肿瘤方面的研究，为卵巢上皮性癌的基 中文摘要 因治疗及细胞免疫治疗提供了新的靶向。 英文摘要