姜黄素、槲皮素等八种效应物对光肩星天牛幼虫PPO影响的试验的分析研究.pdfVIP

摘 要 光肩星天牛[An叩I()phora 、Ik蛀干害虫。近年来，我国部分地区的城市园林绿化也深受其害。1998年美国政府宣佰 将禁止我国带有木质包装和铺垫材糊的产品进入美国境内，以防止一种甲虫一光肩星天 牛危害美目的森林。其报告指出，光肩星天牛一旦在美国传播开来，将对美国槭糖业、 旅游业和生态环境造成约1380亿美元的直接经济损失。2002年的中荚蛀干害虫研讨会 上强调r关于以光肩星天牛、黄斑星天牛为代表的蛀T害虫是我国林木的重要害虫，对 林qp生』一‘构成严重威胁，特别是在以杨柳榆为主的“三北”地区，曾造成毁火性的灾害。 蛀干害虫的危害性越来越受到人们的关注。以昆虫多酚氧化酶为靶标的生物杀虫剂 方面研究不多，尤其蛀干害虫方而尚未见报道。本试验选取蛇床子素、槲皮素、姜黄素、 穿心莲内酯、绿原酸、厚朴酚、补骨脂、咖啡酸八种小同生物活性的植物化学物质作为 多酚氧化酶的效应物来尝试蛀十害虫防治技术的研究。 本实验选取蛀干害虫光肩星天牛为受试生物 实验结果表明，以光肩星天牛幼虫为材料提取多酚氧化酶，经40％饱和硫酸铵处理的 沉淀纯化后，总活力回收率为30．08％，酶活力提高4．486倍。在分别对以光肩星天牛幼 虫为材料的粗酶液进行活性比较的实验中发现，蛹期幼虫的PPO的活力明显高于其它各 龄期。 参照甜菜夜蛾等昆虫的多酚氧化酶反应的最适条件：PH=6．5、T=37℃、最佳反应时 间为2min，研究了蛇床了素、槲皮素、姜黄素、穿心莲内酯、绿原酸、厚朴酚、补骨脂、 咖啡酸八种化合物对该酶活力的影响，结果表明，其中以甲醇为溶剂配制的效应物对光 肩星幼虫多酚氧化酶的活性影响试验中，槲皮素抑制力最强，其次酶活性从大到小顺序 是蛇床了素、绿原酸、姜黄素、穿心莲内酯、咖啡酸，且部小于溶剂对照。其中咀磷酸 缓冲液一甲醇为溶剂的效应物对光肩星幼虫多酚氧化酶的活性影响试验中，蛇床子素的 抑制力晟强，其次酶活性从大到小的顺于是蛇床了素、姜黄素、穿心莲内酯、绿原酸、 咖啡酸、槲皮素，且都小于溶剂对照。根据文献资料和时问的情况，最后选取槲皮素和 姜黄素对该酶活力的抑制机理分析，设定两组，其在底物浓度同定不变的情况下，测 0．95ug／mL的酶活山变化，其二在酶液量固定小变的情况下，测得小同底物浓度0．001、 ug／mL 的酶活力变化。用LineweaverBurk(双倒数作图法)作图，槲皮素和姜黄素的抑制动力学 结果表明，该阿种化合物对该酶的影响均是VⅢax值的变化对j(In值几乎没有任fuj影响， 因此断定槲皮素和姜黄素都是光肩星天牛幼虫多酚氧化酶的非竞争性抑制剂，抑制常数 u u 分别为1，8860 g／mL和1．4549g／mL。槲皮素和姜黄素作抑制剂很早就有人研究， 在昆虫领域的研究报道不多，槲皮素和姜黄素二效应物对光肩星灭牛幼虫多酚氧化酶的 T 抑制机理表现为非竞争性抑制剂，其中槲皮素是以磷酸缓冲液为溶剂，能够反应出槲皮 索在该酶催化L一多巴氧化活力下的反应，而姜黄素是以甲醇为溶剂的，进步分析姜黄 素对该酶的影响时，需要判断甲醇对该酶的影响。 关键词：蛀干害虫：光肩星天牛：槲皮素；姜黄素；多酚氧化酶 抑制动力学 1I Abstract anotorious eatsmewood The TrL】nl【bo砌’，which Motsoh叫印却南Dm幽6，护P”H括)is inwoodRecemlof hasfaIlen int0theVictimoftheMotsh． andse眦es y’partgardens de印ly forbid