啤酒酵母菌株v25t线粒体15srrna基因的一级结构分析.pdf

维普资讯 武 汉 太 学 学 报 $OURNAL OF W UHAN UNIVERSⅡY (自然科学版) (NautralScienceEdition) 1993年第 6期 No．6 i903 啤酒酵母菌株 V25T线粒体 f{b—l乙 15SrRNA基 因的一级结构分析 申宗侯 王鄂生 (武汉大学生命科学学院 ，武汉 ，430072) T．D．FOX Tp (sectIon。fGeneti嚣andDeve~ ’ neuuniversity) k 摘要 报道啤酒酵母(．cerv~ae)菌株V25T线粒体15SrRNA基因全长1651bp核昔酸序列 。’ 并与已发表的啤酒酵母其他四株菌株的线粒体基固一级结构进行了比较． 关键词 酵母线粒体 ．15SrRNA基固．序列分析 ·-_·_- ‘_一 T’’——一 ·。_， __一 中圉法分类号 Q71 TQq ＼ 近年来，核糖体小亚基 RNA功能研究进展令人注 目，不仅 已有直接证据表 明翻译起始阶 段 16SrRNA3端 AantiSD序列与 mRNA5端 SD序列通过碱基配对相互作用对翻译起始起 重要作用0，并且认为 16SrRNA的antiSD序列在翻译延伸过程 中具有扫描rnRNA内部的SD 序列并与之结合0，从而可能具有使翻译过程 中保持正确的阅读框架的作用ES7．在翻译终止阶 段可能也涉及 16SrRNA3端与mRNA中的终止密码子的结合 ．由16SrRNA的一些区域构 成解读位点(decodingsite)的高级结构也正在阐明之中．尽管上述进展均以大肠杆菌 16SrRNA 为模型研究得到，但对其他核糖体小亚基RNA的研究也有参考价值．酵母线粒体小亚基 RNA 为 15SrRNA．我们发现 15SrRNA中530环基部的一个高度保守的G突变为A后，突变的15S rRNA具有UAA校正功能 ：．最近有人根据这一信息将 16SrRNA中相应的G改变为A，证实 了如此突变的 16SrRNA同样也能校正UAAn：．两者的研究具有相互促进作用．近年来对不同 菌株的 15SrRNA基因序列分析证实了该基 因具有多态性 ]．我们对酵母菌株V25T的 158 rRNA基因作了序列分析．其序列与文献报导的四株酵母菌株的 15SrRNA基因序列均有不同 程度的差别．由于 15srRNA基因不具有 内含子，它的基因序列与 rRNA序列是共线的，因而对 不同菌株的 15SrRNA基因序列进行分析和 比较 ，有助于研究 l6SrRNA一级结构与分子功能 的关系． ． 收稿 日期：1993—97—09． 申宗侯 ：男．{9岁-副教授-现从事分子生物学研究 维普资讯 第6期 申宗饺等：啤酒酵母菌株V25T线粒体 15StRNA基因的一缎结构分析 117 1 材料与方法 1．1 材料 质粒 ：Bluescript购 自StratageneInc．药品试剂：序列分析试剂盒购 自usB． SdATP为Amersham产品{酶制剂均为NewEnglandBiolab产品{其他试剂均为Sigma产 品}x光底片为 Kodak产品．菌种 ：酵母菌株 V25T[1，Ecoli，HB101和 EcoliJM101 1．2 方法 1．2．1 酵母mtDNA的提取和含有 15SrRNA基因的限制酶片段的分离