分子模拟与光谱法研究愈创木酚和人免疫球蛋白的键合.PDF

中国科学 B 辑: 化学 2007 年 第37 卷 第1 期: 54~63 SCIENCE IN CHINA PRESS 分子模拟与光谱法研究愈创木酚和 人免疫球蛋白的键合 ①② ① ② ② ①* 何文英 姚小军 刘鹏军 高振霞 胡之德 (① 兰州大学化学化工学院, 兰州 730000; ② 海南师范大学化学系, 海南 571158) 摘要 利用计算机模拟技术结合荧光增敏光谱法、圆二色谱法及傅立叶红外光谱法研究了愈创 木酚与人免疫球蛋白的相互作用. 分子模拟结果显示了愈创木酚与 HIgG(Human Immunoglobulin) 的键合机理和键合模式, 表明维持药物与蛋白质的相互作用力主要是疏水作用和氢键(位于氨基 酸残基LEU 80 和 ASP 65 位). 这与实验所得到的热力学参数判定作用力的结果相一致(依据范 德霍夫公式计算得ΔH 0 与ΔS 0 的值分别为65.55 kJ · mol− 1 和132.95 J · mol− 1 · K− 1). 根据荧光增敏和 偏振的有关方程分别求得不同温度下药物与蛋白相互作用的结合常数及结合位点数; 从紫外光 谱和同步荧光光谱获得的信息定性地讨论了药物与蛋白相互作用时药物对蛋白构型的影响, 圆 二色谱法和红外光谱法(红外去卷积谱和曲线拟合)的结果得到了定量的蛋白质二级结构变化数 据. 且利用 Förster 能量转移理论, 求得药物与蛋白间的键合距离为4.57 nm. 此外, 基于愈创木 酚的荧光敏化效应, 探讨了药物-蛋白质体系的几种物理化参数, 包括电荷密度、离解常数(pKa) 及量子产率的变化效应. 关键词 愈创木酚 人免疫球蛋白 分子模拟 荧光增敏 傅立叶红外光谱法 圆二色谱法 研究小分子配合物与蛋白质的键和作用对生物 肽链, 两条完全相同的 220 个氨基酸的轻链和两条完 化学的发展起着非常重要的作用, 它可作为药物设 全相同的各约 440 个氨基酸的重链组成的球状蛋白 计的筛选基础. 由于这些键和作用会带来蛋白质二 质, 分子量约为 150 kDa[2~4]. 由于HIgG具有显著的 级结构的变化, 通过实验仪器观察并测定这些变化, 键和性质, 它可以作为一种重要的药物运输蛋白, 这 我们便可获得有关蛋白质三级结构的信息. 近几十 有助于研究新药的代谢及目标药物的疗效或毒性等. 年, 已有众多关于溶液中药物与蛋白质相互作用的 但是, 近年大多对HIgG 的研究主要集中在抗体-抗原 研究报道. 免疫球蛋白(IgG)是血清中含量最丰富的 相互作用方面, 有关它们与植物药活性组分相互作 一种蛋白质, 在涉及淋巴结的脾脏和血浆细胞中合 用的报道却很少. 本文在模拟生理条件下用分子模 成, 其重要功能表现在人的免疫应答和许多细胞行 拟技术结合多种光谱法首次探讨了一种植物药活性 为中. 作为B淋巴细胞的细胞表面受体, IgG也能与多 组分愈创木酚与人免疫球蛋白的相互作用. 种代谢物、药物、有机化合物等发生键和作用 [1]. 其 邻- 甲氧基儿茶酚, 即愈创木酚(Guaiacol), 学名 中, HIgG是这类相互作用的研究中较常用的一种模 为邻甲氧基苯酚(O-methoxyphenols), 又名邻羟基苯 型蛋白质, 它是由含有以二硫键连在一起的四条多 甲醚, 邻