紫外差值光谱法测定废水中的微量酚.pdfVIP

实验七 紫外差值光谱法测定废水中的微量酚 一、实验目的 1 ．了解紫外可见分光光度计的使用方法。 2 ．掌握紫外差值光谱法测定微量酚的基本原理。 二、实验原理 苯酚在紫外区有两个吸收峰，在中性溶液中λmax 为 210nm和 270nm，在碱性溶液中，由 于形成酚盐，而使该吸收峰红移至 235nm和 288nm 。所谓差值光谱就是指这两种吸收光谱 相减而得到的光谱曲线。实验中只要把苯酚的碱性溶液放在样品光路上，把中性溶液放在参 比光路上，即可直接绘出差值光谱。 在苯酚的差值光谱图上，选择 288nm 为测定波长，在该波长下，溶液的吸光度随苯酚 浓度的变化有良好的线性关系，遵循比耳定律，即ΔA=Δε⋅C⋅L ，可用于苯酚的定量分析。差 值光谱法用于定量分析，可消除试样中某些杂质的干扰，简化分析过程，实现废水中的微量 酚的直接测定。 三、试剂和仪器 试剂：0.1M KOH 溶液。0.2500g/L 苯酚标准溶液。 仪器：WFZ-26A 紫外可见分光光度计。1cm 厚石英比色吸收池 2 个。 25ml 容量瓶 12 个 四、实验步骤 1．确定测定波长：以蒸馏水作参比，分别绘制苯酚在中性和碱性溶液中的吸收曲线。 然后，将苯酚的中性和碱性溶液分别放置在参比和样品光路中，绘制二者的差值光谱曲线， 根据该差值光谱曲线，确定其测定波长。 2 ．绘制标准曲线：用移液管分别移取苯酚标准溶液 1.0ml、1.5ml、2.0ml 、2.5ml 、3.0ml 于 5 个 25ml 的容量瓶中，另取同样体积苯酚标准溶液于另 5 个 25ml 容量瓶中，分别用水 和 0.1M KOH 稀释至刻度（共需 10 个 25ml 容量瓶）。每对容量瓶所对应的溶液浓度分别是 10mg/L、15mg/L、20mg/L 、25mg/L 、30mg/L 。每一对苯酚标准溶液中的苯酚浓度相同，只 是稀释溶剂不同。在测定波长下，把碱性溶液稀释的标准溶液放在样品光路上，把中性溶液 稀释的标准溶液放在参比光路上，测定吸光度差值。 3 ．测量未知样品中苯酚含量：用移液管分别移取含酚水样 10ml 于 2 个 25ml 容量瓶中， 分别用水和 0.1M KOH 稀释至刻度。在测定波长下，把碱性溶液稀释的待测试样放在样品 光路上，把中性溶液稀释的待测试样放在参比光路上，测定吸光度差值。 五、数据处理 1．用实验步骤2 中测得的吸光度差值，绘制吸光度—浓度曲线，计算回归方程。 2 ．用吸光度—浓度曲线或回归方程，计算水样中的苯酚含量（mg/L ）。 六、思考题 1．苯酚的差值光谱图中有235nm 和 288nm 两个吸收峰，为何选 288nm 作为测定波长？ 2 ．本实验所用的差值光谱法和示差分光光度法有何不同？ 附录：TU-1810 紫外可见分光光度计操作规程 1． 打开仪器电源，仪器开始初始化，一切正常后进入主界面。 2 ． 选择光谱测量，按 F1 ，进行参数设置： （1） 光度方式：A （2 ） 扫描速度：快 （3 ） 采样间隔：1.0 （4 ） 波长范围：400∼200nm （5 ） 纵坐标的范围：0.000∼1.000 3 ． 按“RETURN ”键，返回光谱测量界面，放入空白样品，按“AUTO ZERO ”键进行基线校正。然后， 放入待测样品，按“START”键，进行光谱扫描。所得吸收光谱曲线显示在主机屏幕上，按F2 ，输入 阈值，按“确认”，系统将自动检索并显示峰值。据吸收曲线选择最佳测定波长。按F4 ，可打印谱图。 4 ． 在主界面上，选“定量测定”，按 F1 ，进行参数设置： （1） 标样法 （2 ） 测量波长：287nm （3 ） 浓度单位：mg/L 5 ． 按 F1 键，进入标样法参数设置，、 （1） 按“1”，输入标样数：5 （2 ） 按“2 ”，标样序号：依次输入 1-5#标样的浓度 （3 ） 在一号池中放入空白样，按“AUTO ZERO ”键，进行行空白自动校零。 （4 ） 按“3 ”，将样品放入一号池中，按“START”键，测定吸光度。 （5 ） 重复（4 ）中的操作，直到5 个样品测完。 （6 ） 按“4 ”，绘制工作曲线。 6 ． 按“RETURN ”键，返回定量测量界面，放入空白