钙过量对茶树新梢品质成分及根系生长效果研讨.docVIP

钙过量对茶树新梢品质成分及根系生长效果研讨 　对钙的存在不适应的植物称为嫌钙植物，土壤中过多的钙质（特别是碳酸钙）会妨碍其生长发育[1]。茶树是一种嫌钙植物，对钙的需求比一般作物低得多，过多的钙会造成“钙害”[2]。山东省是江北茶区产茶大省，是我国有名的优质绿茶产区。青岛市地理纬度较高，昼夜温差大，所产绿茶具有叶片厚、滋味浓、香气高、耐冲泡等特点。近年来，青岛市茶产业发展迅速，崂山、胶南、即墨等地茶园种植区域不断扩大，但我省土壤中活性钙含量普遍较高，如青岛市土壤交换性钙含量平均为4.08 g/kg[3]。王跃华等[4]研究表明，钙过量可引起光合系统膜结构的破坏，导致电子传递链受阻，茶树叶片光能利用效率降低，从而影响茶树新梢的生长，成为制约高钙土壤茶区无性系茶树种植规模扩大的关键因素。有关茶树主要品质成分在钙过量条件下的代谢情况鲜见研究。平阳特早茶树属中叶类、灌木型、特早生种，扦插繁殖成活率高，抗逆性和抗寒性强，目前在青岛及周边茶区表现良好。本试验以一年生无性系平阳特早茶树幼苗为材料，采用水培研究钙过量对其主要品质成分的动态影响，旨在探讨钙过量条件下茶树主要生化成分的代谢情况，为高钙土壤茶区发展新建茶园提供参考。 　1 材料与方法 　1.1 试验设计 　采用水培法对一年生平阳特早茶树幼苗进行培养，培养液采用茶树水培的标准营养液配方[5]，水培装置见图1。水培槽用增氧泵通气，每天通风通气8～10 h，每7 d换一次营养液。缓苗培养10 d后，分别设置标准培养液钙浓度（30 mg/L）及4个钙过量钙浓度（90、150、210、270 mg/L）的培养液对试验茶苗进行处理。5个钙浓度处理分别编号为CK、T1、T2、T3、T4，试验选用乙酸钙替代硝酸钙进行钙处理。每个水培槽设置一个处理，水培槽为蓝色不透光的长方形聚乙烯塑料箱（70 cmtimes;45 cmtimes;20 cm），每个水培槽定植茶苗60株（分为5组，每周采样12株），5个处理300株，3次重复，共计用苗900株。茶苗由青岛农业大学即墨茶叶基地提供，水培试验于2013年在青岛农业大学校内试验基地日光温室内进行。 　茶样制备：钙过量处理7 d后开始采样，每周采样一次，连续采样5周，茶树新梢采摘标准为一芽二叶，蒸锅蒸汽杀青120 s，烘箱烘干，样品装入自封袋，于-10 ℃冰柜中保存，用于比较相同处理时间（1～5周）后，钙过量处理相对于标准营养液处理对茶苗生化成分的影响。 　茶苗根系分析取样：每个处理随机挑选5株茶苗并分别标记。处理开始后，每周测定一次，连续测定5周，测定前将茶树幼苗根系洗净后进行根系形态特征分析，每次测定完成后，将分析数据分类保存，并将上述标记茶树幼苗分别置于相应的水培槽中继续培育，以供下次根系分析。 　1.2 测定项目与方法 　茶汤制备：将烘干的茶样，在磨碎机中磨成粉末过40目筛，分别称取0.600 0 g粉碎茶样置于100 mL锥形瓶中，加入约80 mL沸水，在恒温水浴锅中100 ℃水浴45 min，每隔10 min摇晃一次，使茶样中的内含成分被充分浸提。浸提结束后，浸提液趁热抽滤，残渣用热去离子水洗涤2～3次，滤液冷却后定容至100 mL容量瓶中。 　茶多酚总量的测定参照GB/T 8313”2002，采用酒石酸亚铁比色法。游离氨基酸总量测定参照GB/T 8314”2002，采用茚三酮比色法。儿茶素、咖啡碱含量的测定采用高效液相色谱法，参考GB/T 8313”2008的检测方法，并略作修改。流动相A：乙腈90 mL，乙酸20 mL，10 mg/mL EDTA溶液2 mL，去离子水定容到1 000 mL；流动相B：甲醇。色谱条件：检测波长278 nm，柱温35 ℃，流速1 mL/min，进样量40 mu;L，运行时间45 min。梯度条件如表1所示。 　茶叶中茶氨酸含量测定采用高效液相色谱法[6]。色谱仪为Agilent 1100 Series，色谱柱Symmetry-C18（4.6 mmtimes;250 mm，5 mu;m），流动相为0.05%三氟乙酸水溶液，流速为1.0 mL/min，进样量为10 mu;L，检测波长为203 nm，柱温30 ℃，检测时间10 min。每次进样结束后，用乙腈冲洗色谱柱10 min，然后用流动相平衡色谱柱约10 min，至基线平稳，再进行下一组样品的测量。 　茶树幼苗根系形态分析，采用多功能根系扫描分析仪（EPSON Perfection Flatbed Scanner V700/V900）进行测定，分析总根长、总表面积、平均直径、 根尖数等指标。 　各处理均进行3次重复，试验数据采用MS Excel 2003、SAS V8.0统计软件进行统计分析，利用LSD法检验差异显著性。 　2 结果与分析