铅胁迫对景天属及花生属植物生理特性及根系效果分析.docVIP

铅胁迫对景天属及花生属植物生理特性及根系效果分析 　铅（Pb）是土壤中最普遍的重金属污染物之一，其中城市和工矿区是土壤铅污染的重灾区。与传统治理方法相比，通过植物修复技术来清除土壤重金属污染以其潜在的高效、经济及其生态协调性等优势显示出巨大的生命力，成为生态恢复研究的热点，不少学者利用各种植物的特殊功能在净化和改良污染环境方面已做了大量的研究工作[1]，其中根系分泌物的化学生态学是近年来世界各国日益重视的研究热点。研究表明，在多种环境胁迫条件下，植物通过调节其自身的生命活动过程及代谢分泌物，积极应对环境胁迫[2]。本研究分别以野生型和栽培型的景天属（Sedum）、花生属（Arachis）植物为材料，比较分析铅胁迫对植物生长、生理特性以及根系分泌物种类数量的影响，为深入开展化学生态学相关领域研究和生态恢复技术实践提供参考，为重金属污染的生态修复和土地利用提供有效技术支撑。 　1 材料与方法 　1.1 试验材料 　供试的植物材料为景天属的野生种植物紫叶景天（Sedum telephium）和栽培种植物佛甲草（Sedum lineare），花生属的野生种植物蔓花生（Arachis duranensis）和栽培种植物花生（Arachis hypogaea）。其中紫叶景天于2011年采自肯尼亚马赛马拉国家保护区（S1deg;37prime;04Prime;，E35deg;23prime;21Prime;），蔓花生于2012年采自海南东方大田自然保护区（N19deg;15prime;12Prime;，E108deg;44prime;42Prime;）；佛甲草和花生均为栽培种，花生栽培品种为汕油523，购自广东省农业科学院作物研究所花生试验基地。 　1.2 试验设计 　1.2.1 植株培养 采用根箱水培技术。花生属植物种子用70%乙醇灭菌，以无菌水冲洗7～8次，于恒温箱中25 ℃黑暗条件下催芽萌发4 d。当幼苗两片子叶展开时，将长势一致的幼苗用海绵包住茎，移栽到盖上有小孔的水培箱中，培养液采用Hoagland完全培养液。2 d 换一次营养液，每天通气4 h，培养15 d。选取长势均一的佛甲草和紫叶景天，洗净后栽种于水培箱中，Hoagland完全培养液中正常生长1个月。铅污染处理浓度为1 000 mg/L，用Pb（NO3）2配成溶液一次性浇入水培箱。对照及处理均设3次重复。 　1.2.2 根系分泌物的收集 植物材料在铅处理7 d后，用蒸馏水淋洗根部3～5次，然后用滤纸吸干根表面水分，迅速向收集液中加入适量百里酚，将植物移至0.5 mmol/L的CaCl2溶液中收集4 h，收集的根系分泌物经过滤除去杂质后，再过0.45 mu;m膜。取10 mL收集液测定总有机酸含量，10 mL收集液测定可溶性糖含量。合并剩余培养液，在旋转蒸发仪上浓缩至2 mL 左右，用超纯水定容至5 mL，过0.22 mu;m 微孔滤膜后作为有机酸供试品溶液。 　1.2.3 测定方法 根系分泌物中的低分子量有机酸种类和数量用HPLC测定。测定仪器为高效液相色谱仪（LC-10AT，Shimadzu，Japan）。色谱条件如下：反相C18柱（Shimadzu CLC-ODS），流动相为0.025 mol/L KH2PO4 （pH 2.50，过0.45 mu;m滤膜），流速为0.3 mL/min，柱温37 ℃，检测波长为214 nm（Shimadzu spectrophotometric UV detector，Model SPD-10A） ，进样量20 mu;L，标准样品测定时间为20 min，样品测定时间45 min。总有机酸含量的测定用NaOH滴定法。可溶性糖含量采用硫酸蒽酮比色法测定。 　铅水培处理15 d后取样测定各项生理指标。叶片叶绿素用丙酮提取，721型分光光度计在665和645 nm处测定含量；叶片丙二醛（MDA）含量的测定采用硫代巴比妥酸比色法[3]；细胞膜透性用相对电导率表示，采用电极法（DDS-11A型电导率仪）测定[4]；根系活力采用氯化三苯基四氮唑法测定[5]。计算植物样品在试验前后各生理指标的相对百分数。 　铅处理45 d后收获供试植株，用自来水洗净后，去离子水清洗2～3遍，晾干后于105 ℃下杀青 30 min，然后在65 ℃下烘干至恒重，分别测定植株地上部分、根部和总生物量。计算植物样品在试验前后各生长指标的相对百分数。 　1.3 数据统计分析 　所有试验数据用SPSS（12.0版）软件进行方差分析（ANOVA）和LSD检验。 　2 结果与分析 　2.1 铅胁迫处理对植物生理生长指标的影响 　由图1可知，1 000 mg/L铅处理不同程度降低佛甲草、蔓花生和花生的叶绿素含量。其中，佛甲草的降幅最大（48.8%），其次是花生（